Inhibiční studie lidské 17β-HSD3

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Lenka Poláková Školitel: PharmDr. Hana Štambergová, Ph.D. Název práce: Inhibiční studie lidské 17β-HSD3 Enzym 17β-hydroxysteroiddehydrogenasa 3 patřící do proteinové nadrodiny dehydrogenas/reduktas s krátkým řetězcem se podílí především na redukci 4-androsten-3,17- dionu na testosteron. Výkyvy v množství testosteronu mohou být příčinou onemocnění, jakými jsou mužský pseudohermafroditismus či karcinom prostaty. Z tohoto důvodu probíhají studie inhibičních vlivů různých látek na 17β-HSD3, které by mohly nalézt uplatnění v terapii těchto onemocnění. Vytipování farmakologicky zajímavých látek bylo provedeno pomocí modelového systému, v in vitro podmínkách. Na přípravu rekombinantní formy enzymu byla použita hmyzí buněčná linie Sf9. U takto vzniklé 17β-HSD3 bylo provedeno ověření její redukční aktivity vůči androsten-3,17-dionu. Následoval screening potenciálních inhibitorů, přírodních látek z řad flavonoidů a alkaloidů. U sloučenin, které vykazovaly 100 % inhibiční účinek (2-hydroxyflavanon, biochanin A, fumarilin) byla stanovena hodnota IC50.

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Lenka Poláková Supervisor: PharmDr. Hana Štambergová, Ph.D. Title of diploma thesis: Inhibition study of human 17β-HSD3 Enzyme 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3 belonging to the short-chain dehydrogenase/reductase superfamily is involved mainly in reduction of 4-androstane-3,17- dione to testosterone. Any changes in amount of testosterone can result in illness, such as the male pseudhermaphroditism or the prostate cancer. For this reason studies of inhibion effects of various substances have been doing as they could be used in the therapy such as illnesses. Identification of the pharmacologically interesting substances was performed in vitro through the model system. Cell line Sf9 was used to prepare a recombinant form of the target enzyme. Reduction activity of this enzyme was verified towards androstene-4,17-dione. Then screening of potential inhibitors, natural substances: flavonoids and alkaloids, was performed. IC50 value was defined at substances with 100% inhibition effect (2-hydroxyflavanone, biochanine A, fumariline).