Studie UHPLC separace v závislosti na teplotě

Abstract

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Drug Control Candidate: Kateřina Burdová Supervisor: PharmDr. Petr Kastner, Ph.D. Title of diploma thesis: Study of UHPLC separation depending on temperature This thesis analyzes the UHPLC separation and its dependence on temperature. The aim of this project was to map the temperature dependence of the individual chromatographic parameters: retention time, symmetry factor, separation factor and resolution. Seven different commonly used methods were applied to analyze different chemical substances. These include acids, bases and neutral substances. Temperature range at Kinetex C18 column was 25 ř C to 130 ř, 150 x 2.10 mm. The manufacturer guarantees stability of this column at up to 60 řC. As a part of the analysis, the column was exposed to a temperature of 130 ř C for a short period of time. No degradation of the column was observed. The research demonstrated that in all cases, the retention time along with the separation factor decrease as the temperature increases. Similarly, the resolution worsened as the temperature increased and it was only calculated if the individual substances were sufficiently separated throughout the whole temperature range tested. The time of analyzes was...

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát: Kateřina Burdová Školitel: PharmDr. Petr Kastner, Ph.D Název diplomové práce: Studie UHPLC separace v závislosti na teplotě Tato práce je zaměřena na studii UHPLC separace v závislosti na teplotě. Cílem bylo zmapovat teplotní závislost jednotlivých chromatografických parametrů: retenčního času, faktoru symetrie, separačního faktoru a rozlišení. K analýze bylo použito sedm různých rutinně používaných metod s chemicky rozdílnými látkami charakteru kyselin, zásad a neutrálních látek. Bylo použito teplotního rozmezí od 25řC do 130řC na koloně Kinetex C18, 150 x 2,10 mm. U této kolony garantuje výrobce stabilitu do 60 řC. Během analýzy, kdy byla kolona krátkodobě vystavena teplotě i 130řC, nebyla pozorována žádná degradace kolony. Bylo prokázáno, že ve všech případech se stoupající teplotou klesá retenční čas a zároveň s ním i separační faktor. Rozlišení se rovněž zhoršovalo s rostoucí teplotou a bylo počítáno jen v případě, kdy se jednotlivé látky dostatečně separovaly v celém testovaném rozsahu teplot. Doba analýzy se zkracovala s rostoucí teplotou. Pořadí separovaných látek bylo i při vyšších teplotách stejné. Pouze při analýze pikosulfátu sodného, jeho rozkladných produktů a...