Produkce fenylpropanoidů v rostlinné explantátové kultuře

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Farmakognozie Kandidát Mgr. Jana Křepelová Konzultant PharmDr. Marie Kašparová, Ph.D. Název rigorózní práce Produkce fenylpropanoidů v rostlinné explantátové kultuře Předmětem této rigorózní práce bylo sledovat ovlivnění produkce fenylpropanoidů po aplikaci prekurzorů jejich biosyntézy rostlinnou kulturou in vitro. Byl sledován vliv 6, 24, 48, 72 a 168 hodinového působení fenylalaninu a kyseliny skořicové na produkci flavonoidů a isoflavonoidů v suspenzní a kalusové kultuře Trifolium pratense L. (varieta DO-8). Koncentrace 10 mmol.l -1 u obou prekurzorů byla zvolena na základě předchozích pokusů. Tato kultura byla kultivována na médiu podle Gamborga s přídavkem 2 mg.l -1 2,4-dichlorfenoxyoctové kyseliny a 2 mg.l -1 6- benzylaminopurinu, při teplotě 25 o C a světelné periodě 16 hodin světlo/ 8 hodin tma. Maximální obsah flavonoidů, zjištěný fotometrickým stanovením podle Českého lékopisu 2009, byl prokázán u suspenzní kultury Trifolium pratense L. (0,262 %) po 72hodinovém působení fenylalaninu o koncentraci 10 mmol.l -1 a u kalusové kultury Trifolium pratense L. (0,161 %) po 24hodinovém působení fenylalaninu o koncentraci 10 mmol.l -1 . Maximální obsah isoflavonoidů, zjištěný metodou HPLC, byl prokázán v suspenzní i kalusové...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacognosy Candidate Mgr. Jana Křepelová Consultant PharmDr. Marie Kašparová, Ph.D. Title of Thesis Production of phenylpropanoids in the plant explantat culture The aim of this Thesis was to monitor the effect on the production of phenylpropanoids after the application of the biosynthesis precursors by the plant culture in vitro. It was examined the effect of a 6, 24, 48, 72 and 168-hour exposure of the phenylalanine and cinnamic acid on the production of flavonoids and isoflavonoids in the suspension and calus culture Trifolium pratense L. (variety DO-8). The concentration of 10 mmol.l -1 of both precursors was chosen on the basis of the previous experiments. This culture was cultivated on the Gamborg medium with an addition of 2 mg.l -1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 2 mg.l -1 6- benzylaminopurine, at the temperature of 25 o C and 16 hour light / 8 hour dark period. The maximal content of the flavonoids detected by the photometric determination according to Pharmacopoeia Bohemica 2009 was demonstrated in the suspension culture Trifolium pratense L. (0.262 %) after the 72-hour exposure of the phenylalanine of the 10 mmol.l -1 concentration and in the calus culture Trifolium pratense L. (0.161 %) after...