Analytické hodnocení účinných látek kapalinovou chromatografií IV

Abstract

Analytické hodnocení účinných látek kapalinovou chromatografií IV. Diplomová práce Kristýna Ježíková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv, Heyrovského 1203, Hradec Králové V této diplomové práci byly optimalizovány podmínky vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzních fázích ke stanovení indometacinu v králičí krevní plasmě. HPLC analýze předcházela mikroextrakce tuhou fází indometacinu. Pro mikroextrakci bylo použiváno vlákno, které bylo potaženo polydimetylsiloxanem/divinylbenzenem (PDMS/DVB) s šířkou 60 μm. Vlákno bylo ponořeno do vzorku. Vzorek krevní plasmy byl upraven na hodnotu pH na 2,7. Doba sorpce byla stanovena na 30 minut a doba desorpce byla 10 minut. Jako desorpční medium byla mobilní fáze. Mobilní fáze byla tvořena methanolem s vodou v poměru 75:25, pH mobilní fáze bylo upraveno na pH 3. Průtok mobilní fáze byl 0,7 ml/mil. Pro detekci byla zvolena vlnová délka 220 nm. Pro kvantitatívní vyhodnocení byl vybrán vnitřní standard kyseliny flufenamové. Sestrojená kalibrační přímka byla ověřena analýzou modelových vzorků. Byl určen detekční a kvantitativní limit pro indometacin i pro kyselinu flufenamovou.

Analytical determination of active compounds by liquid chromatography IV Diploma thesis Kristýna Ježíková Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové,Department of Pharmaceutical Chemistry and Drug Control,Heyrovského 1203, Hradec Králové In this thesis, conditions were optimized for the reversed-phased high-performance liquid chromatography for quantitative evaluation of indomethacin in a rabbit plasma. Before the determination of indomethacin a solid phase microextraction was made. The fiber was coated with polydimethylsiloxane/divinylbenzene (PDMS/DVB) with a thickness of 60 μm. The fiber was immersed in the sample. The plasma was adjusted to pH 2.7. Sorption time was set at 30 minutes and desorption time was 10 minutes. Indomethacin was desorpted in the mobile phase. The mobile phase consisted of methanol with water (75:25) and pH was adjusted to a value of 3. The flow rate was 0,7 ml / min and detection was carried out at a wavelength of 220 nm. For linearity a calibration curve was costructed. Calibration curve was controled and verified by analysis of model samples prepared. The detection limit and quantitative limit were calculated for indomethacin add flufenamic acid.