Dvoudimenzionální separace v nízkotlakém systému sekvenční injekční chromatografie

Abstract

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Olga Válová Supervisor: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of diploma thesis: Two Dimensional Separation in the Low Pressure System of Sequential Injection Chromatography The subject of this work was to construct a new method for separation of two analytes, which are different in their chemical properties and lipophilicity. Newly described method named Two Dimensional Sequential Injection Chromatography (2D-SIC) for isocratic system was applied in this work for the analysis of pharmaceutical preparation Otobacid N, which contains active substances Dexamethasone and Cinchocaine, i.e. substances with different chemical properties. The separation was carried out in two dimensions of two columns. In the first dimension for separation of Dexamethasone was used column 25 x 4.6 mm C-18 monolithic column with mobile phase acetonitrile/water in ratio of 35/65, flow rate 15 µl/sec. In the second dimension for separation of Cinchocaine was used column 10 x 4.6 mm C-18 monolithic column with precolumn 5 x 4.6 mm C-18 with mobile phase acetonitrile/water in ratio 60/40, flow rate 15 µl/sec. Optimal wavelength at 240 nm was chosen by spectrophotometric detection. Relative standard deviation...

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Olga Válová Konzultant: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Název diplomové práce: Dvoudimenzionální separace v nízkotlakém systému sekvenční injekční chromatografie Předmětem této práce byl vývoj nové metody pro separaci dvou látek, které se liší svými chemickými vlastnostmi a zejména lipofilitou. Nově popsaná metoda s názvem dvoudimenzionální sekvenční injekční chromatografie (2D-SIC) v nízkotlakém systému byla v této práci vyvinuta pro analýzu farmaceutického přípravku Otobacid N, jehož účinnými látkami je dexamethason a cinchokain, tj. látkami s rozdílnými jak chemickými, tak i farmakologickými vlastnostmi. Separace byla provedena na dvou rozdílných kolonách. V první dimenzi pro separaci dexamethasonu byla použita monolitní kolona 25 x 4,6 mm C-18 s mobilní fází acetonitril/voda v poměru 35/65, průtokovou rychlostí 15 µl/s. V druhé dimenzi pro separaci cinchokainu byla použita monolitní kolona 10 x 4,6 mm C-18 s předkolonou 5 x 4,6 mm C-18 s mobilní fází acetonitril/voda v poměru 60/40, průtokovou rychlostí 15 µl/s. Spektrofotometrickou detekcí byla zvolena optimální vlnová délka při 240 nm. Relativní směrodatné odchylky (RSD) opakovatelnosti pro dexamethason se pohybovaly v rozmezí 1,88 -...