Úloha monocytů a nespecifické imunity v diabetu

Abstract

Úvod: Diabetes mellitus je polygenní onemocnění, na jehož vzniku se určitou měrou podílí i environmentální faktory. Vrozená imunita spouští nespecificky první obranné reakce po proniknutí patogenu do organismu, zároveň však nadměrná stimulace složek vrozené imunity může zapříčinit vznik autoimunitních onemocnění, mezi které patří i diabetes 1. typu. Složkami vrozené imunity jsou kromě jiných i Toll-like receptory (TLRs) patřící do skupiny struktur rozeznávajících konzervované molekulární struktury charakteristické pro patogeny. Toll-like receptory jsou hojně exprimovány monocyty, které produkují prolaktin (PRL) mající imunostimulační funkci. Pro objasnění role přirozené imunity v patogenezi diabetu jsme sledovali expresi mRNA i proteinu TLR2 a TLR4. Expresi PRL jsme sledovali pouze na úrovni mRNA. Monocyty jsme pomocí průtokové cytometrie rozdělili na klasické (CD14++) a neklasické (CD14+) a sledovali jejich procentuální zastoupení a míru exprese CD14 antigenu na jejich povrchu. Dílčím cílem této diplomové práce byla optimalizace stimulací monocytů pro plánovanou studii funkce mimohypofyzárního prolaktinu in vitro a určení vhodnosti využití buffy coatů zdravých dárců jako zdravé kontroly. Materiál a metody: Pro sledování exprese mRNA PRL, TLR2 a TLR4 bylo do studie zahrnuto 30 pacientů s...

Introduction: Diabetes mellitus is a polygenic disease and its development is influenced to some extent by environmental factors as well. Innate immunity triggers nonspecifically first defense reactions after penetration of the pathogen into the body, while overstimulation components of innate immunity may give rise to autoimmune diseases, including diabetes type 1. The components of innate immunity are, among others, Toll-like receptors (TLRs) belonging to a group of the structures recognizing preserved molecular structures characteristic of pathogens. Toll-like receptors are abundantly expressed by monocytes which produce prolactin (PRL) having an immunostimulatory function. To clarify the role of innate immunity in the pathogenesis of diabetes, we focused on the expression of mRNA and protein expression of TLR2 and TLR4. The expression of PRL was studied only at the level of mRNA. Monocytes were separated by flow cytometry into classical (CD14++) and nonclassical (CD14+). We monitored their percentages and the degree of expression of CD14 antigen on their surface.The operational objective of this dissertation was to optimize the stimulation of monocytes for the planned study of the function of non-pituitary prolactin in vitro and determine the appropriateness of the use of healthy donors' buffy...