Geneticky modifikované buněčné vakcíny proti bcr-abl-transformovaným buňkám

Abstract

of PhD. Thesis Gene Modified Cellular Vaccines against bcr-abl-Transformed Cells In our laboratory we are focused on the development of therapeutic vaccines against chronic myeloid leukaemia (CML), using as a model system mouse bcr-abl-transformed B210 and 12B1 cells. Both these cells are of early B-cell lineage, express BCR-ABL protein and induce leukaemia after i.v. inoculation; the 12B1 cells also induce solid lymphoma-like tumours after s.c. inoculation. Several types of experimental vaccines directed against these bcr-abl-transformed cells were developed in our laboratory. Since it has been recognized that BCR-ABL protein does not carry the immunodominant epitope, our attention switched to the development of cell-based vaccines that are capable of inducing immune responses against a whole complex of tumour-associated antigens. The present work describes studies on experimental cellular vaccines based on the B210 or 12B1 cells, gene-modified to express either IL-2 or GM-CSF or IL-12. For the transfection of these cells, an optimised electroporation method was used. The vaccines were tested in our mouse BALB/c model. All the cell lines derived from B210 cells secreting IL-2, GM-CSF or IL-12 were non-oncogenic. The oncogenicity of the IL-2 producing 12B1 sublines was reduced and most of the...

dizertační práce Geneticky modifikované buněčné vakcíny proti bcr-abl- transformovaným buňkám V naší laboratoři se zabýváme vývojem terapeutických vakcín proti chronické myeloidní leukémii (CML). Používáme myší modelový systém s buňkami B210 a 12B1 transformovanými fúzním genem bcr-abl. Oboje buňky mají charakter nezralých B- lymfocytů, exprimují protein BCR-ABL a indukují u myší po intravenózním podání nemoc podobnou leukémii. Buňky 12B1 vyvolávají navíc po subkutánním (s.c.) podání solidní nádory charakteru lymfomu. V naší laboratoři bylo vyvinuto již několik typů experimentálních vakcín proti bcr-abl-transformovaným buňkám. Jelikož se zjistilo, že protein BCR-ABL nenese imunodominantní epitop, naše pozornost se zaměřila na vývoj buněčných vakcín, které mohou vyvolat imunitní reakci proti celému komplexu nádorových antigenů. Cílem předložené dizertační práce bylo připravit buněčné vakcíny odvozené od buněk B210 a 12B1, které budou exprimovat IL-2 nebo GM-CSF nebo IL-12, a testovat je na myším BALB/c modelu. Pro transfekci těchto buněk byla zvolena a optimalizována metoda elektroporace. Všechny buněčné linie odvozené od buněk B210, sekretující IL-2 nebo GM- CSF nebo IL-12, byly neonkogenní. Onkogenní potenciál buněk 12B1 produkujících IL-2 byla významně snížená a zvířata, která neonemocněla po...