Identification, expression, and characterization of Phlebotomus orientalis salivary antigens

Abstract

Flebotomové (Diptera: Psychodidae) jsou přenašeči leishmanií (Kinetoplastida: Trypanosomatidae), medicínsky a veterinárně významných parazitů způsobujících leishmaniózu. Tito prvoci jsou inokulováni společně s obsahem slinných žláz do hostitele během sání krve. Slinné proteiny hrají důležitou roli v počáteční fázi vývoje parazita v hostiteli, ale jsou zásadní i pro samice flebotomů a jejich sání krve. Bylo prokázáno, že proteiny ze slin flebotomů jsou mimo jiné schopny hydrolýzy ATP a ADP, vazby biogenních aminů a dalších funkcí, díky nimž dochází k inhibici hemostatických reakcí a modulaci reakcí imunitního systému, což ve svém důsledku umožňuje úspěšné nasátí krve. V minulosti bylo složení slin popsáno u dvanácti druhů flebotomů a my přidali další - Phlebotomus orientalis, který je hlavním přenašečem Leishmania donovani, původce lidské viscerální leishmaniózy ve východoafrických zemích. Z jeho slinných žláz jsme popsali třináct proteinových rodin, což odpovídá dříve publikovaným studiím z ostatních druhů flebotomů, a také jsme identifikovali hlavní antigeny pro dva druhy hostitelů - myši a psy. U opakovaně poštípaných hostitelů dochází k tvorbě specifických IgG protilátek proti slinných proteinům flebotomů. Antigeny ze slinných žláz (nebo jejich varianty připravené v rekombinantní formě) lze...

Sand flies (Diptera: Psychodidae) are vectors of Leishmania spp. (Kinetoplastida: Trypanosomatidae), medically and veterinary important parasites causing leishmaniasis. These protozoans are inoculated into the host during blood-feeding together with the vector saliva. Salivary components are crucial for sand fly female blood-sucking but also play a major role in the initial stage of parasite development. It was demonstrated that this rich mixture of proteins performs different functions after its injection into the host like hydrolyzing ATP and ADP, binding biogenic amines, and others which inhibits the haemostatic reaction and modulate the immune system thus enables the successful feeding. So far, cDNA salivary transcriptomes have been constructed for twelve sand fly species and we added another one - Phlebotomus orientalis, the main vector of Leishmania donovani, a causative agent of human visceral leishmaniasis in East African countries. We described members of thirteen protein families which corresponded with previously published salivary cDNA libraries of other sand fly species and showed the main salivary antigens using sera of experimentally bitten mice and naturally exposed dogs. Specific IgG antibody response is induced against sand fly salivary proteins in repeatedly bitten hosts....