Imunohistochemická analýza exprese fosforylované formy Smad2 po podávání atorvastatinu u experimentální aterogeneze

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Biologických a lékařských věd Kandidát Mgr.Lucie Vybulková Konzultant Doc.PharmDr.Petr Nachtigal, PhD Název rigorózní práce Imunohistochemická analýza exprese fosforylované formy Smad2 po podávání atorvastatinu u experimentální aterogeneze Cíl práce: Cílem této rigorózní práce bylo popsat vliv atorvastatinu na expresi fosforylované formy Smad2 v aterosklerotických plátech ApoE/LDLr-deficitních myší pomocí imunohistochemických metod. Dále byl sledován vliv atorvastatinu na spektrum lipidů a velikost aterosklerotických plátů. Metody: V experimentu byly použity samice kmene C57BL/6J s dvojitým deficitem apolipoproteinu E a LDL- receptoru. Byla u nich provedena biochemická analýza vzorků krve, histologické barvení olejovou červení k detekci lipidů ve tkáních, kvantitativní analýza velikosti lézí a imunohistochemická analýza vzorků aorty se semilunárními chlopněmi pro detekci exprese Smad2 s využitím metodiky Avidin-Biotin a detekcí pomocí DAB. Výsledky: Při biochemické analýze jsme potvrdili nárůst hladin celkového cholesterolu a VLDL po podávání atorvastatinu. Kvantifikací aterosklerotických lézí byla zjištěna menší velikost lézí u ATV skupiny myší. Imunohistochemickou analýzou jsme prokázali expresi fosforylované formy Smad2 v...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Candidate Mgr.Lucie Vybulková Consultant Doc.PharmDr.Petr Nachtigal, PhD Title of Thesis Immunohistochemical analysis of expression of phosphorylated form Smad2 after administration of atorvastatin in experimental atherogenesis Background: The aim of this thesis was to describe the effects of atorvastatin treatment on the expression of phosphorylated form of Smad2 in atherosclerotic plaques in ApoE/LDLr-deficient mice by immunohistochemical methods. Furthermore, the influence of atorvastatin on lipid spectrum and size of atherosclerotic plaques was observed. Methods: In our experiment there were used C57BL/6J female mice with double deficit of apolipoprotein E and LDL receptor. There was performed the biochemical analysis of blood samples, histological staining with oil red for detection of tissue lipids, quantitative analysis of size of lesions and immunohistochemical analysis of samples containing semilunar valves and aorta for the detection of expression of Smad2. It was done using the method Avidin-Biotin and detection with DAB. Results: Using biochemical analysis we confirmed increased levels of total cholesterol and VLDL after the administration of atorvastatin. Smaller size of...