Studium HILIC mechanismu vybraných UHPLC stacionárních fází

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát: Kateřina Ježková Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Studium HILIC mechanismu vybraných UHPLC stacionárních fází Tato diplomová práce se zabývá studiem HILIC mechanismu stacionárních fází Ascentis HILIC Express (2,1 x 100 mm, 2,7 µm, výrobce Sigma-Aldrich), ACQUITY UPLC BEH HILIC (2,1 x 100 mm, 1,7 µm, výrobce Waters) a ACQUITY UPLC BEH AMIDE (2,1 x 100 mm, 1,7 µm, výrobce Waters). K testování vlastností kolon bylo vybráno celkem 15 analytů, které byly rozděleny do skupin na látky kyselé, bazické a neutrální. Měření probíhalo na přístroji UHPLC od firmy Waters za detekce pomocí PDA detektoru při vlnové délce 254 nm. K měření byla použita isokratická eluce. Průtok byl nastaven na 0,4 ml/min, nástřik byl 1-2 µl. Mobilní fázi tvořila ultračistá voda nebo pufr a acetonitril. Pro snadnější hodnocení byly z naměřených hodnot sestrojeny tabulky a grafy. Byly sestrojeny křivky závislostí lin-lin, log-lin a log-log. Kolony byly hodnoceny z hlediska selektivity a retence jednotlivých skupin analytů. Byl sledován vliv procentuálního zastoupení vody a acetonitrilu v mobilní fázi na retenci analytů. Dále byl sledován vliv pH. U kolon Ascentis HILIC Express a ACQUITY UPLC BEH...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Kateřina Ježková Supervisor: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma thesis: A study of HILIC mechanism on selected UHPLC stationary phases This diploma thesis deals with a study of HILIC mechanism of Ascentis HILIC Express (2.1 x 100 mm, 2.7 µm, Sigma-Aldrich), ACQUITY UPLC BEH HILIC (2.1 x 100 mm, 1.7 µm, Waters) and ACQUITY UPLC BEH AMIDE (2.1 x 100 mm, 1.7 µm, Waters) stationary phases. Totally 15 analytes had been selected for testing of the characteristics of the stationary phases. The analytes were divided into groups of acidic, basic and neutral substances. The measurement was performed on UHPLC instrument by Waters with detection by a PDA detector at the wave-length of 254 nm. Isocratic elution was used for the measurement. The flow was set to 0.4 ml/min, injection volume was 1-2 µl. Mobile phase was composed of ultrapure water or buffer and acetonitrile. For an easier evaluation, tables and charts were constructed from measured data. Lin-lin, log-lin and log-log plots were constucted. The stationary phases were evaluated in terms of selectivity and retention of the individual groups of analytes. The influence of a percentage of water and acetonitrile in mobile...