Pre-clinical model of acute promyelocytic leukemia:/study of the anti-leukemic effect induced by ATRA and DNA vaccination
Preklinický model akutní promyelocytární leukemie: studium anti-leukemického efektu vyvolaného pomocí ATRA a DNA vakcinace
dissertation thesis (DEFENDED)
View/ Open
Permanent link
http://hdl.handle.net/20.500.11956/45183Identifiers
Study Information System: 84254
Collections
- Kvalifikační práce [20052]
Author
Advisor
Referee
Stöckbauer, Petr
Degos, Laurent
Faculty / Institute
Faculty of Science
Discipline
-
Department
Department of Cell Biology
Date of defense
20. 9. 2012
Publisher
Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakultaLanguage
English
Grade
Pass
Keywords (Czech)
APL, myší model, DNA vakcinace, imunitní odpověď, minimální residuální chorobaKeywords (English)
APL, animal model, DNA vaccination, immune response, minimal residual diseaseDISERTAČNÍ PRÁCE 2012 POKORNÁ Abstrakt Pro naše studie jsme využili dobře charakterizovaný transgenní myší model akutní promyelocytární leukémie (APL), který odráží lidskou APL ve svých biologických vlastnostech stejně jako v odpovědi na léčbu pomocí konvenční terapie. Hlavním úkolem této studie bylo charakterizovat anti-leukemický účinek kombinované terapie a najít molekulární znaky, které by umožnily předpověď klinického výsledku. Zavedli jsme metodu monitorování minimální residuální choroby založenou na vysoké citlivosti detekce PML-RAR transkriptů pomocí polymerázové řetězové reakce. Ukázali jsme, že tato metoda umožňuje u myší stejně jako u pacientů diagnózu, sledování vývoje a prognózy nemoci. Tuto metodu jsme též využili při hledání PML-RARpositivních buněk v různých tkáních a orgánech pocházejících z dlouhodobě přežívajících myší získaných imunoterapií. U většiny vzorků byl podle očekávání signál negativnícož potvrdilo úspěšnost kombinované terapie. U pěti z patnácti myší jsme však pozorovali positivní signál na onkogen, což prokázalo, že extramedulární ložiska PML-RARpositivních buněk, jako je například mozek/CNS, mohou v organismu přetrvávat a být příčinou relapsů. Dále jsme se zaměřili na charakterizaci imunitní odpovědi vyvolané imunoterapií. Při studiu humorální odpovědi jsme sledovali...
DOCTORAL THESIS 2012 POKORNA Abstract We have used a well characterized transplantable transgenic mouse model which mimics human acute promyelocytic leukemia (APL), both in its biological characteristics and its response to conventional therapeutic drugs. The aim of our study was to better characterize the efficacy of the combined treatment and to determine molecular markers of clinical outcome. We established a minimal residual disease monitoring based on the high sensitivity of detection of PML-RAR transcripts by polymerase chain reaction (PCR) technology in APL mice. We showed that oncogene-specific PCR-based assays allow, like in patients, the diagnosis, follow-up and prediction of disease evolution. Furthermore, PCR assay was used to assess various tissues and organs for the presence of PML-RAR-positive cells in minimal residual disease free long-term survivors. As expected, majority of mice had no measurable tissue level of PML-RAR demonstrating the efficacy of immunotherapy. However, tracking the oncogene-positive cells reveals for the first time that extramedullary PML-RAR-positive cell reservoirs such as the brain may persist and be involved in the leukemia relapse. We aimed at investigating the immune responses involved in the anti-leukemic effect of the combined immutherapy. To evaluate the...