Testování interakce nově syntetizovaných látek s konstitutivním androstanovým receptorem

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Jitka Lágnerová Školitel: Doc. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Název diplomové práce: Testování interakce nově syntetizovaných látek s konstitutivním androstanovým receptorem Nukleární receptory jsou ligandem aktivované transkripční faktory, které regulují expresi genů zapojených do široké škály biologických procesů. Pregnanový X receptor (PXR) a konsitutivní androstanový receptor (CAR) jsou členové sirotčí podrodiny nukleárních receptorů, které byly původně definované jako xenobiotické senzory regulující expresi enzymů metabolizující léčiva s cílem ochránit organismus před toxickými sloučeninami. Změna ve funkci CAR může ovlivnit nejen farmakokinetiku, účinnost a toxicitu léčiv, ale i endokrinní homeostázu, energetický metabolismus a buněčnou proliferaci. Cílem této experimentální diplomové práce bylo prověření interakce nově syntetizovaných látek s lidským CAR. Pomocí metody gene reporter assay a two-hybrid assay jsme otestovali na buněčných kulturách HepG2 a LS174T celkem 40 látek v různých koncentracích. Jako přímé ligandy hCAR s výraznou transkripční aktivitou jsme označili dvě látky, a sice 2-(3-methoxyfenyl)chinazolin-4-thiol resp. -ol působící v koncentraci 10 µM. Výsledky této práce v...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Student: Jitka Lágnerová Supervisor: Doc. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Title of diploma thesis: Interactions of new compounds with constitutive androstane receptor Nuclear receptors (NRs) are ligand-activated transcription factors that regulate the expression of genes involved in a broad range of biological processes. Pregnan X receptor (PXR) and constitutive androstane receptor (CAR) are members of the orphan NR subfamily, that were originally defined as xenobiotic sensors regulating the expression of drug-metabolizing enzymes in order to protect the body from toxic chemicals. Alteration in CAR function may impact not only pharmacokinetics, efficacy, and toxicity of drugs but also endocrine homeostasis, energy metabolism, and cell proliferation. The aim of this study was to verified interactions of newly synthesized compounds with human CAR. Using the methods of gene-reporter assay and two- hybrid assay we tested 40 agents in various concentrations in HepG2 and LS174T cell lines. As the direct ligands of hCAR with significant transcriptional activity we have identified two substances, namely 2 - (3-methoxyphenyl)quinazoline-4-thiol, resp. -ol used in concentration of 10 µM. In the future, the...