Diagnostický příspěvek k hodnocení intervenčních modelů léčby diabetu mellitu 1. typu

Abstract

Při imunointervenční či transplantační léčbě diabetu je nutné monitorovat ukazatele imunitní nebo rejekční destrukce přežívající inzulín produkující tkáně. Disertační práce si klade za cíl zlepšit možnosti sledování průběhu autoimunitního procesu a in vivo průkazu přežívání transplantovaných Langerhansových ostrůvků. Dílčí úkoly zahrnovaly průkaz vitality izolovaných ostrůvků určených k transplantaci měřením respirační aktivity, objasnění průběhu in vitro značení izolovaných ostrůvků superparamagnetickou kontrastní látkou pro následné zobrazení pomocí magnetické rezonance a sledování transportu této látky po transplantaci. Pro identifikaci kontrastních částic v histologickém materiálu jsme studovali nově připravenou paramagnetickou kontranstní látku s navázaným fluoresceinem. Dále jsme se zaměřili na hodnocení autoimunitního procesu pomocí sledování cytokinové odpovědi na specifickou stimulaci autoantigenem. Autoimunitní poškození beta buněk v experimentu u myší jsme se snažili ovlivnit polyklonálními anti-thymocytárními protilátkami. Nová metoda testování respirační aktivity ostrůvků dobře korelovala s ostatními metodami testování kvality ostrůvků a byla navržena do diagnostického schématu před klinickou transplantací. Při studiu intercelulárního transportu železitých kontrastních látek jsme...

During treatment of diabetes mellitus by immunointervention or transplantation, it is necessary to monitor the markers of immune destruction or rejection of surviving insulin producing cells. An aim of this thesis is to improve the possibilities of following autoimmunity and to detect the survival of transplanted pancreatic islet in vivo. Partial aims included vitality testing of isolated islets for transplantation by measurement of respiration activity, observing the process of in vitro labeling of isolated islets with superparamagnetic iron oxide (SPIO) contrast agent for subsequent magnetic resonance imaging (MRI) of islets and observing SPIO particles transport after transplantation. We also studied a new dual paramagnetic contrast agent combined with fluorescein intended for identification of the MRI contrast agent in samples for histology. Further, we assessed autoimmune reaction by evaluation of cytokine response to specific stimulation with auto-antigens. We tried to affect beta-cells destruction by polyclonal anti- thymocyte antibodies in a mouse experimental model. A new method of the islet respiration measurement correlated with other methods of islet quality testing and it was suggested as a diagnostic test before clinical transplantation. Results obtained studying the intercellular...