Izolace proteinů z oviduktální tekutiny krávy afinitní chromatografií na DNA-celulose

Abstract

Z kravských vejcovodů byla izolována oviduktální tekutina. Tekutina byla lyofilizována a získané proteiny separovány pomocí afinitní chromatografie na DNA- celulose. Proteiny v proteklé a vázané frakci byly identifikovány elektroforeticky, ve frakci vázané následně i metodou MALDI-TOF MS. U celkové oviduktální tekutiny byla pozorována antimikrobiální aktivita. Dále byla sledována glykosidasová aktivita izolovaných proteinů oviduktální tekutiny. Byla navržena a provedena příprava sloupce, u nějž nebude vlivem glykosidasových aktivit docházet k degradaci.

Oviductal fluid was collected from cow oviducts. Obtained material was lyophilized and separated by affinity chromatography on DNA-cellulose. Proteins in non-binding and eluted fractions were identified electrophoretically, while those in the eluted fraction were further determined through application of the MALDI-TOF MS method. The complete oviductal fluid demonstrated antimicrobial activity. Furthermore, glycosidase activity of proteins isolated from oviductal fluid was also tested. A column has been designed and prepared in order to avoid the possibility of glycosidase activity leading to degradation. In czech.