Vilv SERCA inhibitorů na produkci oxidu dusnatého a sekreci cytokinů v makrofágách

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: Eva Vandasová Školitel: Doc. RNDr. Eva Kmoníčková, CSc., Doc. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv SERCA inhibitorů na produkci oxidu dusnatého a sekreci cytokinů v makrofágách Seskviterpenové laktony rostlinného původu thapsigargin (TG) a trilobolid (TB) jsou silnými inhibitory Ca2+ -ATPázy sarko/endoplazmatického retikula (SERCA), zvyšují tak koncentraci intracelulárního vápníku. Navíc bylo zjištěno, že TG projevuje určité imunoterapeutické vlastnosti. Ničí pomalu proliferující a neproliferující buňky a inhibuje replikaci virů. Cílem práce bylo sledování imunomodulačního potenciálu těchto látek a látek chemicky rozdílných od seskviterpenických laktonů TG a TB, např. klotrimazolu, artemisininu, dihydroartemisininu a kurkuminu. Tato léčiva jsou rovněž spojena s inhibicí SERCA. Účinek byl analyzován na kulturách potkaních a myších residentních peritoneálních makrofágů. Produkce oxidu dusnatého (NO) zvířecími makrofágy byla stanovena pomocí Grisseova činidla po 24hodinové kultivaci. Hladiny cytokinů v supernatantu byly určeny metodou ELISA po 5-24hodinové kultivaci. Potkaní peritoneální makrofágy produkovaly vysoké množsví NO po stimulaci TG a TB bez jakéhokoli imunitního...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Candidate: Eva Vandasová Supervisor: Doc. RNDr. Eva Kmoníčková, CSc., Doc. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Title of diploma thesis: The influence of SERCA inhibitors on production of nitric oxide and secretion of cytokines in macrophages Sesquiterpene lactones of plant origin such as thapsigargin (TG) and trilobolide (TB) are potent inhibitors of sarco/endoplasmic Ca2+ -ATPase (SERCA), enhancing thus concentration of intracellular calcium. TG has been found to exhibit prospective immunotherapeutic properties. It inhibits growth of slowly proliferating and non- proliferating cells, and inhibits replication of viruses. The aim of present work was to investigate immunomodulatory potential of these compounds and compounds chemically different from sesquiterpene lactone TG, i.e. clotrimazole, artemisinin, dihydroartemisinin, curcumin. All these drugs are related to SERCA inhibition. The effects were analyzed in cultures of rat and mouse resident peritoneal cells. Production of nitric oxide (NO) by animal macrophages was assayed using the Griess reagent after 24hour's culture. Supernatant levels of cytokines were determined by ELISA after 5-24hour's of culture. The rat peritoneal macrophages produced...