Show simple item record

Preparation of neuroactive steroids for study of NMDA receptors
dc.contributor.advisorHodek, Petr
dc.creatorVidrna, Lukáš
dc.date.accessioned2021-03-25T17:33:16Z
dc.date.available2021-03-25T17:33:16Z
dc.date.issued2011
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/33139
dc.description.abstractNeurosteroidy jsou významnou skupinou látek ovlivňujících vzájemnou komunikaci nervových buněk. Podstatou jejich působení je rychlá alosterická modulace membránových receptorů pro přenašeče nervového signálu. Jedním z nejdůležitějších systémů ovlivňovaných neurosteroidy je NMDA receptor. Vazebné místo pro inhibiční steroidy na něm nebylo dosud nalezeno. Předkládaná práce je zaměřena na přípravu fluorescenčně značené fotoafinitní sondy, která může pomoci objasnit strukturu a umístění vazebného místa, a tím usnadnit nalezení účinných neuroprotektiv. Byl připraven (20S)-20-Aido-5β-pregnan-3α-yl N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole- 4-yl)-L-glutamyl 1-ester (8), jehož základní struktura napodobuje endogenní neurosteroid, dále obsahuje fotolabilní azidoskupinu a kovalentně vázanou fluorescenční NBD část. Kromě zmíněného pregnanového derivátu byla syntetizována i další fotoafinitní sonda s modifikovaným steroidním skeletem - pyridinium 17aα-azido-17α-methyl-17a-homo-5β- androstan-3α-yl 3-sulfát (29). Na buňkách z linie HEK293 exprimující NMDA receptory o podjednotkovém složení NR1-1a/NR2B bylo metodou terčíkového zámku ověřeno, že oba připravené deriváty si zachovaly schopnost endogenního neurosteroidu inhibovat aktivovaný NMDA receptor. V experimentálním systému buněčné linie HEK293 byly stanoveny hodnoty...cs_CZ
dc.description.abstractNeurosteroids are an important group of substances that affect communication between neurons. They act as allosteric modulators of membrane receptors for neurotransmitters. One of the most important systems influenced by neurosteroids are NMDA receptors; however, a binding site(s) for their inhibition by steroids have not been found yet. This work is focused on the synthesis of fluorescently labeled photoaffinity probe, which may help explain the structure and location of binding site(s) and simplify the development of new neuroprotectives. A structural analogue of the endogenous neurosteroid, (20S)-20-Azido-5β-pregnan- 3α-yl N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole-4-yl)-L-glutamyl 1-ester (8), was prepared. The structure of compound 8 includes photolabile azido group, as well as covalently bounded fluorescent NBD group. In addition, a photoaffinity probe with a modified steroid skeleton - pyridinium 17aα-azido-17α-methyl-17a-homo-5β-androstan-3α-yl 3-sulfate (29) - was synthesized. The ability of compound 8 and 29 to inhibit activated NMDA receptor has been verified for recombinant NR1-1a/NR2B receptors expressed in HEK293 cells using a patch-clamp technique. Additionally, the IC50 values of compounds 8 and 29 have been calculated. (In Czech) Key words: neuroactive steroid, NMDA receptor, photoffinity...en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.subjectneuroactive steroiden_US
dc.subjectNMDA receptoren_US
dc.subjectphotoffinity labelingen_US
dc.subjectpatch-clamp techniqueen_US
dc.subjectneuroaktivní steroidcs_CZ
dc.subjectNMDA receptorcs_CZ
dc.subjectfotoafinitní značenícs_CZ
dc.subjectmetoda terčíkového zámkucs_CZ
dc.titlePříprava neuroaktivních steroidů pro studium NMDA receptorůcs_CZ
dc.typediplomová prácecs_CZ
dcterms.created2011
dcterms.dateAccepted2011-05-31
dc.description.departmentKatedra biochemiecs_CZ
dc.description.departmentDepartment of Biochemistryen_US
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.identifier.repId79144
dc.title.translatedPreparation of neuroactive steroids for study of NMDA receptorsen_US
dc.contributor.refereePouzar, Vladimir
dc.identifier.aleph001370159
thesis.degree.nameMgr.
thesis.degree.levelnavazující magisterskécs_CZ
thesis.degree.disciplineBiochemistryen_US
thesis.degree.disciplineBiochemiecs_CZ
thesis.degree.programBiochemiecs_CZ
thesis.degree.programBiochemistryen_US
uk.thesis.typediplomová prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csPřírodovědecká fakulta::Katedra biochemiecs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Science::Department of Biochemistryen_US
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-discipline.enBiochemistryen_US
uk.degree-program.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-program.enBiochemistryen_US
thesis.grade.csVelmi dobřecs_CZ
thesis.grade.enVery gooden_US
uk.abstract.csNeurosteroidy jsou významnou skupinou látek ovlivňujících vzájemnou komunikaci nervových buněk. Podstatou jejich působení je rychlá alosterická modulace membránových receptorů pro přenašeče nervového signálu. Jedním z nejdůležitějších systémů ovlivňovaných neurosteroidy je NMDA receptor. Vazebné místo pro inhibiční steroidy na něm nebylo dosud nalezeno. Předkládaná práce je zaměřena na přípravu fluorescenčně značené fotoafinitní sondy, která může pomoci objasnit strukturu a umístění vazebného místa, a tím usnadnit nalezení účinných neuroprotektiv. Byl připraven (20S)-20-Aido-5β-pregnan-3α-yl N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole- 4-yl)-L-glutamyl 1-ester (8), jehož základní struktura napodobuje endogenní neurosteroid, dále obsahuje fotolabilní azidoskupinu a kovalentně vázanou fluorescenční NBD část. Kromě zmíněného pregnanového derivátu byla syntetizována i další fotoafinitní sonda s modifikovaným steroidním skeletem - pyridinium 17aα-azido-17α-methyl-17a-homo-5β- androstan-3α-yl 3-sulfát (29). Na buňkách z linie HEK293 exprimující NMDA receptory o podjednotkovém složení NR1-1a/NR2B bylo metodou terčíkového zámku ověřeno, že oba připravené deriváty si zachovaly schopnost endogenního neurosteroidu inhibovat aktivovaný NMDA receptor. V experimentálním systému buněčné linie HEK293 byly stanoveny hodnoty...cs_CZ
uk.abstract.enNeurosteroids are an important group of substances that affect communication between neurons. They act as allosteric modulators of membrane receptors for neurotransmitters. One of the most important systems influenced by neurosteroids are NMDA receptors; however, a binding site(s) for their inhibition by steroids have not been found yet. This work is focused on the synthesis of fluorescently labeled photoaffinity probe, which may help explain the structure and location of binding site(s) and simplify the development of new neuroprotectives. A structural analogue of the endogenous neurosteroid, (20S)-20-Azido-5β-pregnan- 3α-yl N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole-4-yl)-L-glutamyl 1-ester (8), was prepared. The structure of compound 8 includes photolabile azido group, as well as covalently bounded fluorescent NBD group. In addition, a photoaffinity probe with a modified steroid skeleton - pyridinium 17aα-azido-17α-methyl-17a-homo-5β-androstan-3α-yl 3-sulfate (29) - was synthesized. The ability of compound 8 and 29 to inhibit activated NMDA receptor has been verified for recombinant NR1-1a/NR2B receptors expressed in HEK293 cells using a patch-clamp technique. Additionally, the IC50 values of compounds 8 and 29 have been calculated. (In Czech) Key words: neuroactive steroid, NMDA receptor, photoffinity...en_US
uk.file-availabilityV
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemiecs_CZ
thesis.grade.code2
dc.contributor.consultantChodounská, Hana
uk.publication-placePrahacs_CZ
uk.thesis.defenceStatusO
dc.identifier.lisID990013701590106986


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV