Show simple item record

Preparation of DNA binding domain of transcription factor Fox04 for tryptophan fluorescence measurements
dc.creatorVácha, Petr
dc.date.accessioned2020-07-07T17:58:09Z
dc.date.available2020-07-07T17:58:09Z
dc.date.issued2010
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/32919
dc.description.abstractTato práce je součástí projektu, který se zabývá způsobem interakce 14-3-3 proteinů s forkhead transkripčním faktorem FoxO4. 14-3-3 proteiny jsou proteiny interagující s celou řadou buněčných proteinů. Touto interakcí ovlivňují aktivitu, či buněčnou lokalizaci svých vazebných partnerů. Transkripční faktor FoxO4 hraje významnou roli v regulaci buněčného cyklu, apoptózy, reakce na oxidativní stres a řady dalších buněčných procesů. Transkripční aktivita FoxO4 je řízena skrze fosforylaci protein kinasou B. Fosforylace způsobí inhibici vazby FoxO4 na DNA, navázání 14-3-3 proteinu na FoxO4 a transport vzniklého komplexu z jádra. Jedním z cílů projektu je objasnění molekulárního mechanismu těchto interakcí. Hlavním cílem této práce bylo vytvoření mutantní cDNA proteinu FoxO4 obsahujícího pouze dva tryptofanové zbytky pomocí cílené bodové metageneze, který poslouží jako modelový systém pro studium konformačních změn DNA vazebné domény FoxO4 při interakci se 14-3-3 proteinem. Po získání cílové mutantní cDNA tento protein exprimovat a purifikovat. Kromě toho byla součástí práce ještě exprese a purifikace proteinu 14-3-3, který je součástí modelového systému pro studium mechanismu interakce těchto dvou proteinů.cs_CZ
dc.description.abstractThis thesis was worked up as a part of a project that is concerned with the manner of interaction of 14-3-3 proteins with forkhead transcriptional faktor FoxO4. 14-3-3 proteins are proteins interacting with a considerable amount of cell proteins. They affect activity and cell localization through this interaction. Transcriptional factor FoxO4 plays significant role in regulation of a cell cycle, apoptosis, respond to oxidative stress and many other cell proceses. Transcriptional aktivity of FoxO4 is regulated through phophorylation by protein kinases B. This phosphorylation induce inhibition of FoxO4/DNA binding, induce FoxO4/14-3-3 binding and thus relocalization of this complex from a cell core to cytoplasma. One of main goals of this project is to explain molecular mechanisms of these interactions. Main goal of this thesis was to create cDNA of a mutational protein FoxO4 containing just two tryptophan residues by site directed mutagenesis and after gaining this cDNA to express and pyrity this mutational FoxO4. This mutational protein was going to be a part of a model system for conformational changes studies. Besides expression and purification of 14-3-3 protein that is also part of our model system was performed.en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.titlePříprava DNA vazebné domény transkripčního faktoru FoxO4 pro tryptofanová fluorescenční měřenícs_CZ
dc.typerigorózní prácecs_CZ
dcterms.created2010
dcterms.dateAccepted2010-11-19
dc.description.departmentKatedra fyzikální a makromol. chemiecs_CZ
dc.description.departmentDepartment of Physical and Macromolecular Chemistryen_US
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.identifier.repId98689
dc.title.translatedPreparation of DNA binding domain of transcription factor Fox04 for tryptophan fluorescence measurementsen_US
dc.identifier.aleph001289642
thesis.degree.nameRNDr.
thesis.degree.levelrigorózní řízenícs_CZ
thesis.degree.disciplinePhysical Chemistryen_US
thesis.degree.disciplineFyzikální chemiecs_CZ
thesis.degree.programChemistryen_US
thesis.degree.programChemiecs_CZ
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csFyzikální chemiecs_CZ
uk.degree-discipline.enPhysical Chemistryen_US
uk.degree-program.csChemiecs_CZ
uk.degree-program.enChemistryen_US
thesis.grade.csProspěl/acs_CZ
thesis.grade.enPassen_US
uk.abstract.csTato práce je součástí projektu, který se zabývá způsobem interakce 14-3-3 proteinů s forkhead transkripčním faktorem FoxO4. 14-3-3 proteiny jsou proteiny interagující s celou řadou buněčných proteinů. Touto interakcí ovlivňují aktivitu, či buněčnou lokalizaci svých vazebných partnerů. Transkripční faktor FoxO4 hraje významnou roli v regulaci buněčného cyklu, apoptózy, reakce na oxidativní stres a řady dalších buněčných procesů. Transkripční aktivita FoxO4 je řízena skrze fosforylaci protein kinasou B. Fosforylace způsobí inhibici vazby FoxO4 na DNA, navázání 14-3-3 proteinu na FoxO4 a transport vzniklého komplexu z jádra. Jedním z cílů projektu je objasnění molekulárního mechanismu těchto interakcí. Hlavním cílem této práce bylo vytvoření mutantní cDNA proteinu FoxO4 obsahujícího pouze dva tryptofanové zbytky pomocí cílené bodové metageneze, který poslouží jako modelový systém pro studium konformačních změn DNA vazebné domény FoxO4 při interakci se 14-3-3 proteinem. Po získání cílové mutantní cDNA tento protein exprimovat a purifikovat. Kromě toho byla součástí práce ještě exprese a purifikace proteinu 14-3-3, který je součástí modelového systému pro studium mechanismu interakce těchto dvou proteinů.cs_CZ
uk.abstract.enThis thesis was worked up as a part of a project that is concerned with the manner of interaction of 14-3-3 proteins with forkhead transcriptional faktor FoxO4. 14-3-3 proteins are proteins interacting with a considerable amount of cell proteins. They affect activity and cell localization through this interaction. Transcriptional factor FoxO4 plays significant role in regulation of a cell cycle, apoptosis, respond to oxidative stress and many other cell proceses. Transcriptional aktivity of FoxO4 is regulated through phophorylation by protein kinases B. This phosphorylation induce inhibition of FoxO4/DNA binding, induce FoxO4/14-3-3 binding and thus relocalization of this complex from a cell core to cytoplasma. One of main goals of this project is to explain molecular mechanisms of these interactions. Main goal of this thesis was to create cDNA of a mutational protein FoxO4 containing just two tryptophan residues by site directed mutagenesis and after gaining this cDNA to express and pyrity this mutational FoxO4. This mutational protein was going to be a part of a model system for conformational changes studies. Besides expression and purification of 14-3-3 protein that is also part of our model system was performed.en_US
uk.file-availabilityV
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra fyzikální a makromol. chemiecs_CZ
thesis.grade.codeP
uk.publication-placePrahacs_CZ


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV