Vývoj extrakce a HPLC stanovení vitamínů A a D v léčivém přípravku Infadolan

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Název diplomové práce: Vývoj extrakce a HPLC stanovení vitamínů A a D v léčivém přípravku Infadolan Tereza Košvancová Školitel : PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Byly nalezeny vhodné chromatografické podmínky pro stanovení obsahu vitamínů A a D v masti Infadolan® za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Optimálních výsledků bylo dosaženo na analytické koloně Onyx Monolithic C18 (50 x 4,6 mm) s předkolonou (5 x 4,6 mm). Jako mobilní fáze byla použita směs acetonitril : methanol : voda v poměru 49 : 49 : 2 (v/v/v) při průtokové rychlosti 2 ml/min, nastřikovaném objemu 20 µl, izokratickém režimu a laboratorní teplotě. K detekci byl použit UV detektor s vlnovými délkami 265 a 290 nm. Vnitřním standardem se stal vitamín E acetát. Látky byly eluovány v pořadí: vitamín A acetát, vitamín D a vitamín E acetát. Během hledání vhodných extrakčních činidel pro vývoj metody byla vyzkoušena extrakční schopnost mnoha základních analytických rozpouštědel. Látky s nejvhodnějšími vlastnostmi byly použity v pěti vícestupňových extrakcích. Získané výsledky byly porovnány a navržen další postup.

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Title of graduation theses: Development of extraction and HPLC determination of vitamins A and D in pharmaceutical formulation Infadolan Tereza Košvancová Supervisor : PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. The High Performance Liquid Chromatography conditions for the determination of vitamins A and D in ointment Infadolan® were found. The analytical column Onyx Monolithic C18 (50 x 4,6 mm) with guard column (5 x 4,6 mm) was used for achievement of optimal results. A mobile phase composed of acetonitrile : methanol : water in ratio 49 : 49 : 2 (v/v/v), the flow-rate 2 ml/min, the sample volume 20 µl, the isocratic mode and laboratory temperature were chosen. The UV detection was set at 265 and 290 nm. Vitamin E acetate was used as an internal standard. Substance were eluted in the following order: vitamin A acetate, vitamin D and vitamin E acetate. During the search for suitable extraction agents for the development of an extraction method the ability of many basic analytical solvents was tested. Agents with the most suitable properties were used in five multi-stage extractions. Achieved results were compared and next procedure was proposed.