Genista tinctoria L. in vitro - ovlivnění produkce sekundárních látek

Abstract

Genista tinctoria L. in vitro - ovlivnění produkce sekundárních látek Mgr. Gabriela Fiedlerová Souhrn Cílem této práce bylo studium vlivu abiotického elicitoru − ultrazvuku působícího v různých časových intervalech na produkci sekundárních metabolitů − isoflavonoidů v suspenzní kultuře Genista tinctoria L. Kultura byla kultivována v živném Schenk−Hildebrandtovu médiu s přídavkem růstových regulátorů (kys. 2,4−dichlorfenoxyoctová v koncentraci 0,5 mg/l a kinetin v koncentraci 0,1 mg/l) při teplotě 25 řC a světelné periodě 16 hodin světlo/8 hodin tma. Jako elicitor byl použit ultrazvuk (o hustotě výkonu 0,1 W/cm3 a stálé frekvenci 35 kHz) po dobu 1, 2, 3, 4 a 5 minut. Vzorky byly odebírány ihned a dále pak po 6, 12, 24, 48, 72 a 168 hodinách po expozici ultrazvukem. Obsah isoflavonoidů (genistinu, daidzeinu, genisteinu, formononetinu a biochaninu A) byl stanoven pomocí HPLC. Z výsledků je zřejmé, že ultrazvuk jako elicitor zvyšoval produkci genistinu a daidzeinu u suspenzní kultury Genista tinctoria L.. Nejvyšší obsah genistinu (0,08 %) byl zaznamenán při elicitaci ultrazvukem po dobu 3 minut a odběru po 72 hodinách po expozici ultrazvuku a stejné hodnoty bylo dosaženo při elicitaci po dobu 4 minut a odběru po 12 hodinách po expozici ultrazvuku. Největší zvýšení produkce daidzeinu, o 400 % oproti kontrole,...

Genista tinctoria L. in vitro - the affecting of secondary metabolites production Mgr. Gabriela Fiedlerová Summary The aim of this work was the study of the effect of the abiotic elicitor ultrasound in different time intervals on the production of secondary metabolites − isoflavonoids in Genista tinctoria L. suspension cultures. The culture was cultivated in the Schenk-Hildebrandt nutritive medium with adding of the growth regulators (2,4−dichlorfenoxyacetic acid 0,5 mg/l and kinetin 0,1 mg/l), temperature of 25 řC and luminous period 16-hours light/8−hours darkness. As the elicitor ultrasound (about power density 0,1 W/cm3 and fixed frequency 35 kHz) for a period of 1, 2, 3, 4 and 5 minutes was used. The samples were taken immediately and further then after 6, 12, 24, 48, 72 and 168 hours after ultrasound exposition. The quantity of isoflavonoids (genistin, daidzein, genistein, formononetin and biochanin A) was determinated by the HPLC method. The results of this work show that ultrasound as elicitor is able to increase genistin and daidzein production in Genista tinctoria L. suspension culture. The highest quantity of genistin (0,08 %) was detected during the ultrasound elicitation for a period of 3 minutes and taking out after 72 hours after ultrasound exposition and the same content was achieved during...