Explantátová kultura Trifolium pratense L.

Abstract

SOUHRN Explantátová kultura Trifolium pratense L. Jana Křepelová Základním předpokladem úspěšné elicitace, která se využívá ke zvýšení produkce sekundárních metabolitů, je mimo jiné nalezení vhodného elicitoru, jeho koncentrace a optimální doby působení na rostlinnou kulturu in vitro, což bylo předmětem této diplomové práce. Byl sledován vliv 6, 24, 48 a 168 hodinového působení roztoku síranu železnatého (ve čtyřech koncentracích) na produkci flavonoidů a isoflavonoidů v suspenzní kultuře Trifolium pratense L. (varieta DO-9 a Sprint). Tato kultura byla kultivována na médiu podle Gamborga s přídavkem 2 mg.l-1 2,4-dichlorfenoxyoctové kyseliny a 2 mg.l-1 6- benzylaminopurinu, při teplotě 25 o C a světelné periodě 16 hodin světlo/ 8 hodin tma. Maximální obsah flavonoidů, zjištěný fotometrickým stanovením podle Českého lékopisu 2005, byl prokázán u suspenzní kultury Trifolium pratense L. (varieta DO-9) (0,500 %) po 48hodinovém působení elicitoru o koncentraci 10 μmol a u suspenzní kultury Trifolium pratense L. (varieta Sprint) (0,415 %) také po 48hodinovém působení koncentrace elicitoru 10 μmol . Maximální obsah isoflavonoidů, zjištěný metodou HPLC, byl prokázán u suspenzní kultury Trifolium pratense L. (varieta DO-9) po 6 hodinovém působení elicitoru o koncentraci 1000 μmol (0,38 % genistinu; 0,08 % daidzeinu;...

Jana Křepelová Explantat culture of Trifolium pratense L. A principal precondition for successful elicitation used to increase the production of secondary metabolites is, among other, finding a suitable elicitor, its concentration and the optimal period of time of action on the plant culture in vitro, which was the aim of the present thesis. The effect was examined of a 6, 24, 48 and 168 hour action of the solution of ferrous sulphate (in four concentrations) on the production of flavonoids and isoflavonoids in the suspension culture Trifolium pratense L. (variety DO-9 and variety Sprint) cultiveted on a Gamborg medium with an addition of 2 mg.l-1 of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 2 mg.l-1 6- benzylaminopurine, at the temperature of 25o C and 16 hour light/ 8 hour dark period. The maximal content of flavonoids found by a photometric determination according to Pharmacopoeia Bohemica 2005 was demonstrated in the suspension culture Trifolium pratense L. (variety DO-9) (0,500 %) after 48 hour action of the elicitor of the 10 μmol concentration and in the suspension culture Trifolium pratense L. (variety Sprint) (0,415 %) also after 48 hours action 10 μmol concentration. The maximal content of isoflavonoids found by a HPLC metod was demonstrated in the suspension culture Trifolium pratense L....