Show simple item record

Treatment of biological samples before HPLC analysis - determination of alfa-tocoferol in erythrocyte membrane
dc.contributor.advisorSolich, Petr
dc.creatorPospíchalová, Naďa
dc.date.accessioned2017-04-20T02:40:36Z
dc.date.available2017-04-20T02:40:36Z
dc.date.issued2010
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/24265
dc.description.abstractα-Tokoferol je hlavním antioxidantem buněčných membrán savců, jeho účinky však nespočívají pouze v antioxidační aktivitě. Řada studií poukazuje na to, že hladiny α-tokoferolu v membráně erytrocytů vypovídají lépe o jeho saturaci organismu než hladiny plasmatické. Tato diplomová práce se zabývá stanovením α-tokoferolu pomocí HPLC-UV s využitím diferenciální ultracentrifugace a extrakce tuhou fází (SPE) v přípravě vzorku. Vzorky erytrocytů byly ultracentrifugovány (288 000  g, 3 minuty, 4 řC) v přítomnosti butylhydroxytoluenu (BHT), D-mannitolu, HEPES a CaCl2. Poté byl α-tokoferol extrahován z membrán erytrocytů hexanem pomocí extrakce na tuhou fázi za použití kyseliny askorbové a vnitřního standardu tokoferol acetátu. Extrakt, rozpuštěný v methanolu, byl separován na monolitické koloně Chromolith Performance RP-18e (100  4,6 mm) 100% methanolovou mobilní fází. Absorbance byla změřena při 295 nm.cs_CZ
dc.description.abstractα-Tocopherol is the principal membrane antioxidant in mammalian cells, although antioxidant is not the only mechanism of this vitamin. Many studies consider erytrocyte α-tocopherol levels to be more suitable to assess the tocopherol status of organism than its plasma levels. This thesis presents erytrocyte membranes α-tocopherol HPLC-UV analysis with diferential ultracentrigation and solid phase extraction sample pretreatment. Red cell samples were ultracentrifuged (288 000 × g, 3 minutes, 4 řC) in the presence of butylated hydroxytoluene (BHT), D-mannitol, HEPES and CaCl2. Then α-tocopherol was extracted from erytrocyte membranes by solid phase extraction with n-hexane in the presence of ascorbic acid and tocopherol acetate internal standard. The extract was dissolved in methanol and separated on the monolithic column Chromolith Performance RP-18e (100  4.6 mm) using a 100% methanol as the mobile phase. The absorbance of α-tocopherol was measured at 295 nm wavelength.en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Královécs_CZ
dc.titleÚprava biologického materiálu před HPLC analýzou - stanovení alfa tokoferolu v erytrocytární membráněcs_CZ
dc.typediplomová prácecs_CZ
dcterms.created2010
dcterms.dateAccepted2010-06-01
dc.description.departmentDepartment of Analytical Chemistryen_US
dc.description.departmentKatedra analytické chemiecs_CZ
dc.description.facultyFaculty of Pharmacy in Hradec Královéen_US
dc.description.facultyFarmaceutická fakulta v Hradci Královécs_CZ
dc.identifier.repId67456
dc.title.translatedTreatment of biological samples before HPLC analysis - determination of alfa-tocoferol in erythrocyte membraneen_US
dc.contributor.refereeMatysová, Ludmila
dc.identifier.aleph001296643
thesis.degree.nameMgr.
thesis.degree.levelnavazující magisterskécs_CZ
thesis.degree.disciplineOdborný pracovník v laboratorních metodáchcs_CZ
thesis.degree.disciplineSpecialist in Laboratory Methodsen_US
thesis.degree.programZdravotnická bioanalytikacs_CZ
thesis.degree.programHealthcare bioanalyticsen_US
uk.thesis.typediplomová prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csFarmaceutická fakulta v Hradci Králové::Katedra analytické chemiecs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Pharmacy in Hradec Králové::Department of Analytical Chemistryen_US
uk.faculty-name.csFarmaceutická fakulta v Hradci Královécs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Pharmacy in Hradec Královéen_US
uk.faculty-abbr.csFaFcs_CZ
uk.degree-discipline.csOdborný pracovník v laboratorních metodáchcs_CZ
uk.degree-discipline.enSpecialist in Laboratory Methodsen_US
uk.degree-program.csZdravotnická bioanalytikacs_CZ
uk.degree-program.enHealthcare bioanalyticsen_US
thesis.grade.csVýborněcs_CZ
thesis.grade.enExcellenten_US
uk.abstract.csα-Tokoferol je hlavním antioxidantem buněčných membrán savců, jeho účinky však nespočívají pouze v antioxidační aktivitě. Řada studií poukazuje na to, že hladiny α-tokoferolu v membráně erytrocytů vypovídají lépe o jeho saturaci organismu než hladiny plasmatické. Tato diplomová práce se zabývá stanovením α-tokoferolu pomocí HPLC-UV s využitím diferenciální ultracentrifugace a extrakce tuhou fází (SPE) v přípravě vzorku. Vzorky erytrocytů byly ultracentrifugovány (288 000  g, 3 minuty, 4 řC) v přítomnosti butylhydroxytoluenu (BHT), D-mannitolu, HEPES a CaCl2. Poté byl α-tokoferol extrahován z membrán erytrocytů hexanem pomocí extrakce na tuhou fázi za použití kyseliny askorbové a vnitřního standardu tokoferol acetátu. Extrakt, rozpuštěný v methanolu, byl separován na monolitické koloně Chromolith Performance RP-18e (100  4,6 mm) 100% methanolovou mobilní fází. Absorbance byla změřena při 295 nm.cs_CZ
uk.abstract.enα-Tocopherol is the principal membrane antioxidant in mammalian cells, although antioxidant is not the only mechanism of this vitamin. Many studies consider erytrocyte α-tocopherol levels to be more suitable to assess the tocopherol status of organism than its plasma levels. This thesis presents erytrocyte membranes α-tocopherol HPLC-UV analysis with diferential ultracentrigation and solid phase extraction sample pretreatment. Red cell samples were ultracentrifuged (288 000 × g, 3 minutes, 4 řC) in the presence of butylated hydroxytoluene (BHT), D-mannitol, HEPES and CaCl2. Then α-tocopherol was extracted from erytrocyte membranes by solid phase extraction with n-hexane in the presence of ascorbic acid and tocopherol acetate internal standard. The extract was dissolved in methanol and separated on the monolithic column Chromolith Performance RP-18e (100  4.6 mm) using a 100% methanol as the mobile phase. The absorbance of α-tocopherol was measured at 295 nm wavelength.en_US
uk.publication.placeHradec Královécs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra analytické chemiecs_CZ


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV