Predikce chemosenzitivity na 5-fluorouracil a jeho deriváty u nemocných léčených chemoterapií pro kolorektální karcinom

Abstract

Cíle: 5-fluorouracil (5-FU) je nejčastěji a nejdéle používaným cytostatikem v léčbě kolorektálního karcinomu (CRC). V úvodu této práce jsme vyhodnotili stupen exprese klíčových enzymu metabolismu 5-FU - thymidylátsyntázy (TS), thymidinfosforylázy (TP) a dihydropyrimidindehydrogenázy (DPD) ve vzorcích kolorektálního karcinomu a v okolní střevní sliznici za použití metody RT-PCR a imunohistochemické analýzy. Odlišné exprese ve studovaných tkáních mohou mít vliv na protinádorovou aktivitu a toxicitu léčby fluoropyrimidiny. Publikované výsledky analýz genové a proteinové exprese nejsou jednotné, proto jsme korelovali genovou expresi TS a TP mRNA z čerstvé zmražené tkáně stanovenou pomocí kvantitativní RT-PCR a proteinovou expresi stanovenou imunohistochemickou analýzou z parafinem-fixovaných vzorku kolorektálního karcinomu. Dále jsme u pacientů s lokalizovaným CRC studovali prognostický a prediktivní význam klíčových enzymu metabolismu 5-FU, který doposud není jednoznacně určen. (...) Imunohistochemická analýza prokázala signifikantně vyšší TS expresi v nádorové tkáni ve srovnání se zdravou sliznicí a signifikantne vyšší TP expresi ve stromatu nádoru ve srovnání s expresí ve zdravé sliznici (p<0,001). Nebyl nalezen žádný vzájemný vztah mezí expresí TS mRNA, TP mRNA a proteinovou expresí TS, TP v nádorové tkáni...

Aim: 5-Fluorouracil (5-FU) is the most commonly used anticancer drug for colorectal cancer (CRC). Initially, we aimed to compare expression of 5-FU metabolic enzymes genes: thymidylate synthase (TS), thymidin phosphorylase (TP) and dihydropyrimidine dehydrogenase (DPD) in colorectal cancer and normal colon mucosa. We have tried to prove the correlation of the mRNA levels in fresh frozen tissues and protein expression using immunohistochemistry in paraffin-embedded colorectal cancer and adjacent normal tissues. Finally, we aimed to clarify the prognostic and predictive value of the expression of the 5-FU metabolic enzyme genes in patients with early colorectal cancer. (...) Results: We have found significantly higher DPD mRNA levels in normal colon tissue than in tumor tissue (p=0,03), but no significant differences in TS mRNA (p=0,34) and TP mRNA (p=1,0) levels in tumor and normal tissue. Immunohistochemically we have determined significantly higher TS expresion in tumor than in normal tissue (p=0,02) and significantly higher TP expression in stroma 9 cancer tissue than in normal tissue (p<0,001). No linear relationships were found between mRNA expression and protein TS and TP expression (p=0,28 resp. p=0,87). High TP mRNA expression associated with worse prognosis (p=0,05 HR 4,1), also high protein...