Detekce změn neuronálních drah po lézi CNS pomocí dextran aminu.

Abstract

Souhrn Název práce: Detekce změn neuronálních drah po lézi CNS pomocí dextran aminu. Cíl práce: Vypracovat metodiku pro značení drah pomocí látky přenášené axonálním anterográdním transportem a porovnat iontoforetickou a tlakovou aplikaci BDA. Metoda: Experiment byl proveden na dospělých laboratorních potkanech, kterým byl iontoforeticky a tlakově aplikován anterográdní tracer BDA. Týden po aplikaci byli v hluboké anestézii usmrceni, jejich mozky vyjmuty, zmrazeny v suchém ledu a skladovány v -70řC. Poté byla mozková tkáň krájena na tenké koronální řezy (50 µm). Následně řezy imunohistochemicky barveny a nataženy na mikroskopovací sklíčka. U jednotlivých řezů bylo sledováno probarvení nervových vláken v místě aplikace, jeho okolí a v kontralaterální straně hemisféry. Výsledky: Po aplikaci anterográdního traceru BDA do nervové tkáně došlo k probarvení nervových vláken v oblasti místa vpichu, okolí a v kontralaterální straně hemisféry. Jako efektivnější metoda pro jeho aplikaci byla dle výsledků stanovena metoda tlaková. Klíčová slova: anterográdní tracer, BDA, iontoforetická aplikace, mozková ischemie, neuroplasticita

Title of work: Detection of neuronal pathways after CNS lesions by using dextran amine. Aim: Develop a metodology for pathway tracing with the substance transmitted by axonal anterograde transport and compare iontophoretic and pressure injection of BDA. Methods: The experiment was performed on adult rats which where injected iontophoretic and pressure anterograde tracer BDA. One week after injection were decapitated in deep anesthesia, their brains removed, frozen in dry ice and stored at -70řC. The brains were then cut into thin coronal slice (50 µm), immunolabeled and loaded on microscopic slides. Individual sections were examined labeling nerve fibers at the injection site, its surroundings and contralateral side of the hemisphere. Results: After injections of anterograde tracer BDA into the nervous tissue have been shown labeling of nerve fibers at the injection site, surroundings and contralateral side of the hemisphere. As an efficient method for its injection was determined according to results of the pressure method. Key words: anterograde tracer, BDA, iontophoretic injection, cerebral ischemia, neuroplasticity