Charakterizace a využití zwitteriontových stacionárních fází v HPLC

Abstract

Tato diplomová práce se zabývá charakterizací a porovnáním dvou zwitteriontových stacionárních fází kolon SeQuant ZIC-HILIC a Atlantis Premier BEH Z-HILIC. Analýzy byly prováděny v separačním módu hydrofilní interakční kapalinové chromatografie (HILIC). Ligand navázaný na stacionární fázi obou kolon je totožný, sulfoalkylbetain. Hlavním rozdílem mezi těmito stacionárními fázemi jsou částice, na kterých jsou ligandy navázané. Typ částic významně přispívá kodlišnýminterakčním a separačním vlastnostem těchto stacionárních fází. Pro základní charakterizaci stacionárních fází byl nejprve proveden Tanakův test. Z výsledků tohoto testu bylo patrné, že kolona SeQuant ZIC-HILIC vykazuje větší kationtově-výměnný charakter než kolona Atlantis Premier BEH Z-HILIC, která má naopak větší aniontově-výměnný charakter. Obě stacionární fáze vykazovaly vyšší hodnotu parametru popisujícího hydrofilitu než hydrofobicitu, což potvrzuje jejich polární charakter. Vlastnosti stacionárních fází byly dále zkoumány a porovnávány na základě analýz modelových analytů, kterými byla řada malých polárních analytů, kyselin, bází, amfoterních a neutrálních analytů a jejich směsí. Analýzy byly prováděny v různých poměrech acetonitrilu s 10mM acetátovým pufrem o pH = 4,7. Z počátku byl testován 5mM acetátový pufr o pH = 6,8, který se...

This diploma thesis deals with the characterization and comparison of two zwitterionic stationary phases of SeQuant ZIC-HILIC and Atlantis Premier BEH Z-HILIC columns. Analyses were performed in the hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) separation mode. The ligand bound to both stationary phases of these columns is identical, sulfoalkylbetaine. The main difference between these stationary phases is in the particles to which the ligands are bound. The type of the particles significantly contributes to different interaction and separation properties of the stationary phases. Firstly, for the basic characterization of these stationary phases, a Tanaka's test was performed. The results of this test showed that the SeQuant ZIC-HILIC column has greater cation-exchange properties than the Atlantis Premier BEH Z-HILIC column, which, has on the other hand greater anion-exchange properties. Both stationary phases showed a higher value of the parameter describing hydrophilicity than hydrophobicity, confirming their polar nature. The properties of the stationary phases were further examined and compared based on the analysis of model analytes. These analytes included a range of small polar analytes, acids, bases, ampholytes, neutral analytes, and their mixtures. Analyses were performed at...