Vliv abstinenčního syndromu po vysazení morfinu na receptory spřažené s G proteiny a na redoxní rovnováhu v mozku potkana

Abstract

Although morphine is one of the most effective analgesics available, its long-term use is severely limited by the development of tolerance and dependence. Molecular mechanisms responsible for these effects have been the focus of intensive research for decades aimed at developing safer and more effective pain treatments. The aim of this thesis was to contribute to a better understanding of the molecular actions of morphine, as an understanding of these processes is essential to develop better therapeutic approaches. Using western blot analysis, we investigated the effect of 10-day treatment with increasing doses of morphine and its subsequent withdrawal on key components of opioid signalling in the rat cerebellum and cerebral cortex. Amounts of opioid receptors, various heterotrimeric G protein subunits, GRK3 kinase and β-arrestin 2 were examined. Furthermore, the levels of adenosine A3 receptor and cannabinoid receptor type 1 were detected. Finally, we also investigated the effect of morphine and its withdrawal on oxidative stress markers. Morphine administration resulted in a significant decrease in GRK3 kinase levels in both brain regions, and these changes remained even after withdrawal. However, there was no significant change observed in the content of opioid receptors, different G protein...

Ačkoliv je morfin jedním z nejúčinnějších dostupných analgetik, jeho dlouhodobé užívání je značně omezeno rozvojem tolerance a závislosti. Na objasnění molekulárních mechanismů zodpovědných za tyto účinky se zaměřují desítky let výzkumu s nadějí na vývoj bezpečnějších a účinnějších analgetik. Cílem této diplomové práce bylo přispět k lepšímu porozumění molekulárního působení morfinu, neboť pochopení těchto procesů je nezbytné k vyvinutí lepších terapeutických přístupů. Pomocí metody western blot jsme zkoumali vliv desetidenního podávání stupňujících se dávek morfinu a jeho následného vysazení na klíčové komponenty opioidní signalizace v mozečku a kůře mozkové potkanů. Byly detekovány hladiny opioidních receptorů, podjednotek heterotrimerních G proteinů, GRK3 kinasy a β-arrestinu 2. Mimo to byly zkoumány hladiny adenosinového A3 receptoru a kanabinoidního receptoru typu 1. V neposlední řadě jsme sledovali také vliv morfinu a jeho vysazení na markery oxidativního stresu. Podávání morfinu vedlo k signifikantnímu poklesu hladin GRK3 kinasy v obou částech mozku a tento pokles přetrvával i po vysazení. Tato práce však neprokázala vliv morfinu na množství opioidních receptorů, podjednotek G proteinů ani β-arrestinu 2. Množství adenosinového A3 receptoru a kanabinoidního receptoru typu 1 zůstalo rovněž...