Sledování změn v expresi mikroRNA u karcinomu cervixu

Abstract

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Kralove Department of Biochemical Sciences Author: Bc. Tereza Štveráková Supervisor: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Consultant: Ing. Helena Kovaříková, Ph.D. Title of diploma thesis: Monitoring changes in microRNA expression in cervical cancer Cervical cancer is the fourth most common cancer among women globally. Prevention of cervical cancer is based on routine screening using quality diagnostic tests. This diploma thesis focused on searching for sensitive and specific diagnostic markers that would detect the early stage of carcinogenesis. Suitable candidates for a diagnostic markers are microRNAs (miRNAs), which negatively post-transcriptionally regulate gene expression. In carcinogenesis, miRNAs are deregulated and may play a significant role in cancer development. The aim of this diploma thesis was to identify significantly deregulated miRNAs that could be used as diagnostic markers of cervical cancer. In this diploma thesis, the combination of miR-423-5p and miR-25-3p was selected as the endogenous miRNA control based on the results of real-time PCR analysis and the results of the RefFinder algorithm. After that, the relative expression of selected miRNAs (miR-10b-5p, miR-145-5p a miR-182-5p) was determined by real-time PCR and...

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Autor: Bc. Tereza Štveráková Vedoucí diplomové práce: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultant: Ing. Helena Kovaříková, Ph.D. Název diplomové práce: Sledování změn exprese mikroRNA u karcinomu cervixu Karcinom cervixu je celosvětově čtvrtým nejčastěji diagnostikovaným nádorovým onemocněním u žen. Základem prevence karcinomu cervixu je rutinní screening s použitím kvalitních diagnostických testů. Tato diplomová práce se zaměřila na hledání citlivých a specifických diagnostických markerů, které by zachytily ranou fázi kancerogeneze. Vhodnými kandidáty k využití jako diagnostický marker jsou mikroRNA (miRNA), které negativně posttranskripčně regulují genovou expresi. Při kancerogenezi jsou miRNA deregulovány, čímž se podílejí na rozvoji karcinomu. Cílem této diplomové práce bylo identifikovat významně deregulované miRNA, které by mohly být potenciálními diagnostickými markery karcinomu cervixu. V rámci této diplomové práce byla vybrána jako endogenní kontrola kombinace miR-423-5p a miR-25-3p, a to na základě výsledků analýzy real-time PCR a vyhodnocení algoritmem RefFinder. Dále se stanovila relativní exprese vybraných miRNA (miR-10b-5p, miR-145-5p a miR-182-5p) pomocí real-time PCR a s využitím metody...