Prognostický význam transkripce genu pro angiopoietin-2 u chronické lymfocytární leukémie

Abstract

Chronická B-lymfocytární leukémie (B-CLL) je nejčastěji se vyskytující leukémie u dospělých, která je charakteristická vysoce variabilním průběhem choroby. Podle poznatků z posledních let je patrné, že se na její patogenezi významně podílí angiogeneze. Jedním z důležitých cytokinů účastnících se tohoto procesu je angiopoietin-2 (Ang-2), jehož zvýšená aktivita byla pozorována u některých hematologických malignit. Údajů týkajících se Ang-2 u CLL je však velmi málo. V průběhu své práce jsem měřila množství transkriptu pro Ang-2 pomocí kvantitativní PCR v reálném čase u 24 neléčených pacientů s CLL. Pro normalizaci rozdílů v koncentraci templátu mezi jednotlivými vzorky byl použit transkript kontrolního genu Abl1. U 10 pacientů byla zjištěna zvýšená koncentrace mRNA pro Ang-2 (poměr Ang-2/Abl1 > 5x10-3 ). U ostatních 14 pacientů bylo množství transkriptu pro Ang-2 nízké či nedetekovatelné (poměr Ang-2/Abl1 < 5x10-3 nebo Cp pro Ang-2 > 35). Získané hodnoty byly následně porovnány metodou X2 s dalšími prognostickými faktory (mutační stav IgVH, exprese CD38 a ZAP70), stádiem onemocnění dle Raie a průběhem onemocnění. Exprese ZAP-70 a CD38 byla analyzována průtokovou cytometrií. Mutační stav IgVH byl stanoven z cDNA standardní metodou využívající databázi IgBLAST. Statistickým vyhodnocením získaných dat...

Chronic lymphocytic leukemia (CCL) is the most common leukemia, which is characterised by a high variable progress. According to scientific evidence acquired during several last years, angiogenesis has been proven to play an important role in pathogenesis of CLL. One of the very important cytokines playing role in this process is angiopoietin-2 (Ang-2). Elevated expression of Ang-2 has been reported in several hematological malignancies; however, data regarding Ang-2 in CLL are very limited. I measured Ang-2 transcript levels in purified mononuclear cels of 24 untreated patients with CLL by quantitative real-time PCR and normalized them for differences in RNA concentration in each sample by quantitation of transcript of Abl1 housekeeping gene. Elevated Ang-2 mRNA concentrations were detected in 10 cases (Ang-2 to Abl1 expression ratio > 5x10-3). On the other hand, 14 patients had very low or undetectable levels of Ang-2 mRNA (Ang-2 to Abl1 expression ratio < 5x10-3 or Ang-2 Cp > 35). The association between Ang-2 expression and other prognostic factors, clinical stage according to Rai and clinical course of CLL was evaluated by Chi-Square method. There was a significant association between high Ang-2 mRNA levels and unmutated IgVH genes (n= 21, p = 0.012), but not with CD38 (p = 0.057), ZAP-70 expression (p...