Studium profylaktického účinku glykoklastrů na modelu bakteriální adherence

Abstract

Cystická fibróza (CF) je autozomálně recesivní dědičné onemocnění, které vzniká mutaci CFTR genu kódujícího CFTR protein sloužící v těle jako iontový kanál. Pro pacienty s CF je typická zvýšená adherence bakterií k plicnímu epitelu způsobená vznikem velmi hustého hlenu pokrývajícího povrch dýchacích cest a pozměněnou glykosylací v plicích. Tyto podmínky zvyšují citlivost pacientů s CF k bakteriálním infekcím plic působeným zejména Pseudomonas aeruginosa (PA). Významnou roli v patogenitě PA hrají její virulentní faktory jako jsou například lektiny PA-IL a PA-IIL, které umožňují adhezi PA na hostitelské buňky vazbou na jejich povrchové receptory obsahující D-galaktosu (PA-IL) nebo L-fukosu (PA-IIL). V této práci bylo hlavním cílem ověřit schopnost daných anti-PA-IIL slepičích protilátek a multivalentních inhibitorů PA-IIL (konkrétně tzv. glykoklastrů na bázi fukosy) zabránit adherenci PA na plicní epiteliální buňky a tím u pacientů s CF zamezit PA infekcím. Profylaktický účinek obou antiadhezivních agens (protilátky anti-PA-IIL, fukosylované glykoklastry) byl studován ex vivo na modelovém systému imortalizovaných plicních epiteliálních buněčných linií CuFi-1 izolovaných od nemocného s CF a NuLi-1 izolovaných od zdravé osoby. Pro adhezní test byl jako bakteriální model použit kontrolní kmen bakterií...

Cystic fibrosis (CF) is an autosomal recessive disease caused by the mutations of the CFTR gene encoding CFTR protein which serves like a field ion channel in the body. For the patients suffering from CF is a typical increased adherence of bacteria to lung epithelium caused by the accumulation of thickened mucus on the surface of air passages and varied glycosylation in lungs. These conditions increase sensitivity of patients who suffer from CF to bacterial infections of lungs caused by Pseudomonas aeruginosa (PA). A considerable role in the pathogenicity of PA plays its virulent factors such as for example PA-IL and PA-IIL lectins, which enable an adherence of PA on the host cells joining on its surface receptors containing D-galactose (PA-IL) or L-fucose (PA-IIL). In this thesis the main aim was to verify an ability of given anti-PA-IIL chicken antibodies and multivalent PA-IIL inhibitors (specifically of the so-called fucose-based glycoclaters) to prevent PA adherence on lung epithelial cells and to stop from a formation of the PA infections at the patients. A prophylactic impact both antiadhesive agens (anti-PA-IIL antibodies, fucose-based glycoclasters) was studied ex vivo on the model system of immortalized lung epithelial cell lines CuFi-1 isolated from the ill patients with CF and NuLi-1...