Využití separačních technik ve fytochemické analýze

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutické botaniky Kandidát: Simona Víchová Školitel: RNDr. Jaroslav Jenčo, Ph.D. Název diplomové práce: Využití separačních technik ve fytochemické analýze Alkaloidní extrakt získaný z nati s nezralými tobolkami z rostliny Papaver rhoeas L. byl podroben fytochemické studii. Sumární extrakt byl rozdělen na jednotlivé frakce pomocí Flash chromatografie. Po provedení biologických testů inhibičních aktivit vůči acetylcholinesteráze a butyrylcholinesteráze byla vybrána frakce PPR-11 a PPR-12, která vykazovala nejvyšší aktivitu vůči butyrylcholinesteráze (95,55 ± 0,96 a 97,03 ± 0,79 % inhibice butyrylcholinesterázy při 50 µg/ml). Spojená frakce PPR 11-12 byla purifikována pomocí preparativní chromatografie na jednotlivé podfrakce, které byly přečištěny pomocí preparativní tenkovrstvé chromatografie. Z podfrakce PPR 11-12Fr#8-A byla získána monokomponentní krystalická látka alkaloidního charakteru. Na základě instrumentálních metod byl analyt identifikován jako alkaloid aporfinového typu (+)-kaaverin. U (+)-kaaverinu byly stanovené inhibiční aktivity vůči acetylcholinesteráze a butyrylcholinesteráze, a porovnány s rutinně využívanými fytofarmaky k léčbě Alzheimrovy choroby. Naměřené hodnoty byly vyjádřeny jako IC50. Klíčová...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department: Department of Pharmaceutical Botany Candidate: Simona Víchová Supervisor: RNDr. Jaroslav Jenčo, Ph.D. Title of dissertation thesis: The use of separation techniques in phytochemical analysis The alkaloid extract obtained from stems with immature capsules from Papaver rhoeas L. was subjected to a phytochemical study. The summary extract was separated into individual fractions by Flash chromatography. After performing biological tests for inhibitory activities of acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase, the fraction PPR-11 and PPR-12 was selected. The fraction showed the highest activity against butyrylcholinesterase (95.55 ± 0.96 and 97.03 ± 0.79% inhibition of butyrylcholinesterase at 50 /g / ml). The combined PPR 11-12 fractions were purified by preparative chromatography to individual subfractions, which were purified by preparative thin layer chromatography. A monocomponent crystalline substance of alkaloid origin was obtained from the subfraction named PPR 11-12Fr # 8-A. Based on instrumental analysis, the analyte was identified as an alkaloid of the aporphine type (+)-caaverine. The inhibitory activities against acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase for (+)-caaverine, were determined and compared with...