Hodnocení vybraných obsahových látek v ovoci metodou HPLC-DAD-CAD

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Stanislava Košková Školitel: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Konzultant: Ing. Radek Vávra, Ph.D. (VŠÚO Holovousy) Název diplomové práce: Hodnocení vybraných obsahových látek v ovoci metodou HPLC-DAD-CAD Tato diplomová práce byla zaměřena na stanovení obsahu sedmi fenolických látek, konkrétně kyseliny gallové, kyseliny chlorogenové, epikatechinu, rutinu, floridzinu, kvercetinu a floretinu v jablkách 20 odrůd, které byly dodány Výzkumným a šlechtitelským ústavem ovocnářským Holovousy s.r.o. K tomuto účelu byla použita HPLC separace v reverzním módu využívající kolonu Luna Omega Polar C18 (150 mm x 4,6 mm; 5 µm). Jako mobilní fáze byla použita směs ultra čisté vody okyselené kyselinou octovou na pH 2,8 a acetonitrilu. Byl zvolen lineární gradient s postupným zvyšováním podílu organické složky z počátečních 10 % na 50 % během 10 min separace. Následovala ekvilibrace kolony - do 12,50 min při 10 % organické složky. Celková délka separace byla 12,5 min při průtokové rychlosti 1 ml/min. Teplota kolonového prostoru byla nastavena na 30 řC. Detekce byla provedena pomocí DAD (254, 280, 320 nm) a CAD detektoru (teplota nebulizéru 25 řC). Součástí této práce je test způsobilosti chromatografického systému,...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradci Králové Deparment of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Stanislava Košková Supervisor: Doc. PharmDr. Hana Sklenářová, Ph.D. Consultant: Ing. Radek Vávra, Ph.D. (VŠÚO Holovousy) Title of diploma thesis: Evaluation of selected substances in fruit by HPLC-DAD-CAD method Thisdiploma thesis was focused on determination of seven phenolic compounds, namely gallic acid, chlorogenic acid, epicatechin, rutin, phloridzin, quercetin, phloretin in twenty apple cultivars, that have been delivered by the Research and Breeding Institute of Pomology Holovousy s.r.o. For this purpose HPLC separation in reverse mode was used, using the column Omega Polar C 18 (150 mm x 4.6 mm; 5 µm). As the mobile phase the mixture of an ultrapure water acidified with the acetic acid to pH 2.8 and acetonitrile was used. A linear gradient was chosen with a gradual increase of the organic component from the initial 10 % to 50 % during 10 min of separation.This was followed with column equilibration - up to 12.50 min to 10 % organic component. The overall separation time was 12.50 min at a flow rate of 1 ml/min. Column temperature was set to 30 řC. Detection was performed using DAD (254, 280, 320 nm) and CAD detector (nebulizer temperature 25 řC). Part of this thesis is system...