Studium deplece cholesterolu v lidské kožní bariéře

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Organic and Bioorganic Chemistry Pavla Audrlická Supervisor: prof. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Title of diploma thesis: Study of cholesterol depletion in human skin barrier Barrier function of human skin barrier dwells in intercellular lipid membranes of the uppermost skin layer, the stratum corneum (SC), composed of equimolar mixture of ceramides (Cer), free fatty acids (FFA) and cholesterol (Chol).1 Chol is required for proper lipid organization of SC, however, it stays unclear, why is it present in an amount so high that it separates from other lipids.2 Experiments using synthetic model membranes with decreased Chol content suggested that molar ratio of Cer:FFA:Chol 1:1:0,4 is sufficient for lipid barrier formation and its complex functionality.3 The aim of this work was to manipulate Chol content directly in human SC and to study the effects of decreased Chol content on the SC permeability and microstructure. Ex vivo SC obtained from healthy donors was extracted by methyl-β-cyclodextrin (MCD) to reduce natural Chol content. The extracted SC did not show significant changes in Cer or FFA whilst the amount of Chol was lowered to 78 %. SC barrier properties were evaluated by measurements of transepidermal water loss...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra organické a bioorganické chemie Pavla Audrlická Školitel: prof. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název diplomové práce: Studium deplece cholesterolu v lidské kožní bariéře Kožní bariéra člověka spočívá v mezibuněčné lipidové matrix nejsvrchnější vrstvy kůže, stratum corneum (SC). Tuto lipidovou matrix tvoří přibližně ekvimolární směs ceramidů (Cer), volných mastných kyselin (MK) a cholesterolu (Chol).1 Cholesterol je nutný pro organizaci lipidů a tvorbu funkční bariéry. Není však znám důvod jeho přítomnosti v množství tak vysokém, že se s ostatními lipidy již nemísí a tvoří separované domény.2 Experimenty na syntetických membránách se sníženým obsahem Chol ukázaly, že pro tvorbu a komplexní funkci lipidové bariéry je dostačující molární poměr Cer:MK:Chol 1:1:0,4.3 Cílem této práce bylo snížit obsah Chol v ex vivo lidském SC a zkoumat vliv takového zásahu na permeabilitu a mikrostrukturu SC. Byla vyvinuta metoda selektivní extrakce Chol ze SC ex vivo od zdravých dárců pomocí methyl--cyklodextrinu (MCD). Obsah Chol byl snížen na 78 % původního množství, extrahované SC nejevilo změny v obsahu Cer a MK. Permeabilita byla studována pomocí měření transepidermální ztráty vody (TEWL), elektrické impedance (EI) a propustnosti pro theofylin...