dc.contributor.advisor | Štěpánek, Václav | |
dc.creator | Blumenstein, Jan | |
dc.date.accessioned | 2019-10-01T10:18:49Z | |
dc.date.available | 2019-10-01T10:18:49Z | |
dc.date.issued | 2019 | |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/20.500.11956/109533 | |
dc.description.abstract | Corynebacterium glutamicum is a Gram-positive non-sporulating soil bacterium which is used in biotechnology as a producer of amino acids, nucleotides, biofuels and alcohols. The aim of this thesis was to create a hybrid σ factor of RNA polymerase which would be able to recognize a matching hybrid promoter without effect on expression of the host genes. Based on the σD and σH amino acid sequence, two types of hybrid factors, σDH and σHD , were designed by the sequence combination of sigD and sigH. As an alternative approach, based on the in silico homology modeling, mutations of wild-type σH in the region recognizing the -35 promoter element of the σH -dependent promoter were introduced. Hybrid promoters were constructed by combining the -35 and -10 promoter regions that were derived from the σD - and σH - dependent promoters. Promoter activity was determined by using gfpuv reporter gene under the control of hybrid promoter. The expression of gfpuv in strains with hybrid sigma factors σDH / σHD and hybrid promoters was rather low compared to strains that carried wild-type σ factor and the respective promoter. The aim of the thesis was achieved by using one of the mutant σH factor (σmutH_6A ) with alterations in the region recognizing the -35 element of the σH -dependent promoter. This mutant σ... | en_US |
dc.description.abstract | půdní bakterie využívaná průmyslu jako producent aminokyselin, nukleotidů, biopaliv a alkoholů. Cílem této práce bylo vytvořit hybridní faktor σ rozpoznávat pouze příslušný hybridní promotor, takže neovlivní e genů. Na základě aminokyselinových sekvencí faktorů σ a σ genů navrženy 2 typy hybridních faktorů σ σ σ σ byly dále na základě přirozeného faktoru σ σ promotoru. Hybridní promotory byly vytvořeny kombinací 10, které pocházely ze σ a σ ů promotorů s použitím prokázalo, že exprese genu σ σ kmeny, které nesly přirozený faktor σ a příslušný promotor. Při použití jednoho z ů σ σ ) se záměnami 35 σ promotorů došlo k a tedy dosažení cíle. Klíčová slova: | cs_CZ |
dc.language | Čeština | cs_CZ |
dc.language.iso | cs_CZ | |
dc.publisher | Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakulta | cs_CZ |
dc.subject | Corynebacterium glutamicum | cs_CZ |
dc.subject | faktor sigma | cs_CZ |
dc.subject | promotor | cs_CZ |
dc.subject | Corynebacterium glutamicum | en_US |
dc.subject | sigma factor | en_US |
dc.subject | promoter | en_US |
dc.title | Hybridní faktory sigma RNA polymerasy u Corynebacterium glutamicum | cs_CZ |
dc.type | diplomová práce | cs_CZ |
dcterms.created | 2019 | |
dcterms.dateAccepted | 2019-09-10 | |
dc.description.department | Department of Genetics and Microbiology | en_US |
dc.description.department | Katedra genetiky a mikrobiologie | cs_CZ |
dc.description.faculty | Faculty of Science | en_US |
dc.description.faculty | Přírodovědecká fakulta | cs_CZ |
dc.identifier.repId | 195727 | |
dc.title.translated | Hybrid sigma factors of RNA polymerase in Corynebacterium glutamicum | en_US |
dc.contributor.referee | Krásný, Libor | |
thesis.degree.name | Mgr. | |
thesis.degree.level | navazující magisterské | cs_CZ |
thesis.degree.discipline | Genetika, molekulární biologie a virologie | cs_CZ |
thesis.degree.discipline | Genetics, Molecular Biology and Virology | en_US |
thesis.degree.program | Biology | en_US |
thesis.degree.program | Biologie | cs_CZ |
uk.thesis.type | diplomová práce | cs_CZ |
uk.taxonomy.organization-cs | Přírodovědecká fakulta::Katedra genetiky a mikrobiologie | cs_CZ |
uk.taxonomy.organization-en | Faculty of Science::Department of Genetics and Microbiology | en_US |
uk.faculty-name.cs | Přírodovědecká fakulta | cs_CZ |
uk.faculty-name.en | Faculty of Science | en_US |
uk.faculty-abbr.cs | PřF | cs_CZ |
uk.degree-discipline.cs | Genetika, molekulární biologie a virologie | cs_CZ |
uk.degree-discipline.en | Genetics, Molecular Biology and Virology | en_US |
uk.degree-program.cs | Biologie | cs_CZ |
uk.degree-program.en | Biology | en_US |
thesis.grade.cs | Výborně | cs_CZ |
thesis.grade.en | Excellent | en_US |
uk.abstract.cs | půdní bakterie využívaná průmyslu jako producent aminokyselin, nukleotidů, biopaliv a alkoholů. Cílem této práce bylo vytvořit hybridní faktor σ rozpoznávat pouze příslušný hybridní promotor, takže neovlivní e genů. Na základě aminokyselinových sekvencí faktorů σ a σ genů navrženy 2 typy hybridních faktorů σ σ σ σ byly dále na základě přirozeného faktoru σ σ promotoru. Hybridní promotory byly vytvořeny kombinací 10, které pocházely ze σ a σ ů promotorů s použitím prokázalo, že exprese genu σ σ kmeny, které nesly přirozený faktor σ a příslušný promotor. Při použití jednoho z ů σ σ ) se záměnami 35 σ promotorů došlo k a tedy dosažení cíle. Klíčová slova: | cs_CZ |
uk.abstract.en | Corynebacterium glutamicum is a Gram-positive non-sporulating soil bacterium which is used in biotechnology as a producer of amino acids, nucleotides, biofuels and alcohols. The aim of this thesis was to create a hybrid σ factor of RNA polymerase which would be able to recognize a matching hybrid promoter without effect on expression of the host genes. Based on the σD and σH amino acid sequence, two types of hybrid factors, σDH and σHD , were designed by the sequence combination of sigD and sigH. As an alternative approach, based on the in silico homology modeling, mutations of wild-type σH in the region recognizing the -35 promoter element of the σH -dependent promoter were introduced. Hybrid promoters were constructed by combining the -35 and -10 promoter regions that were derived from the σD - and σH - dependent promoters. Promoter activity was determined by using gfpuv reporter gene under the control of hybrid promoter. The expression of gfpuv in strains with hybrid sigma factors σDH / σHD and hybrid promoters was rather low compared to strains that carried wild-type σ factor and the respective promoter. The aim of the thesis was achieved by using one of the mutant σH factor (σmutH_6A ) with alterations in the region recognizing the -35 element of the σH -dependent promoter. This mutant σ... | en_US |
uk.file-availability | V | |
uk.publication.place | Praha | cs_CZ |
uk.grantor | Univerzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra genetiky a mikrobiologie | cs_CZ |
thesis.grade.code | 1 | |