Studium onemocnění cystická fibrosa na myším experimentálním modelu

Abstract

Cystická fibrosa je dědičné onemocnění projevující se změnou podmínek v plicích vedoucích ke zvýšené kolonizaci patogenů, především Pseudomonas aeruginosa (PA). U pacientů dochází ke snížené sialylaci glykokonjugátů epiteliálních buněk, což vede k odhalení sacharidových struktur, na které se bakterie PA snáze váží, např. pomocí lektinu PA-IIL. Léčba infekce způsobené bakterií PA antibiotiky je problematická z důvodu vzniku rezistence. Proto jsou hledány nové terapeutické přístupy. Jednou ze studovaných možností je pasivní imunizace slepičími protilátkami proti lektinu PA-IIL. Tyto protilátky jeví schopnost snižovat adhezi bakterií PA na plicní epiteliální buňky ex vivo. Aby mohl být efekt slepičích protilátek dále studován, je nutné vytvořit vhodný experimentální in vivo model. Cílem bylo optimalizovat myší model, který by napodoboval podmínky v plicích jako u pacientů s CF. V první řadě bylo zapotřebí vybrat vhodný bioluminiscenční kmen z těchto tří kmenů PA-lux 1, PA-lux 2 a PA-XEN 41. Bylo nutné vybrat kmen s nejvyšší schopností bioluminiscence, které je využíváno pro sledování bakteriální infekce in vivo. Na základě nejvyšší naměřené hodnoty relativní luminiscence byl vybrán kmen PA-lux 1 kultivovaný ve zkumavce s kónickým dnem. Následně byl proveden experiment na myších, při kterém byl...

Cystic fibrosis is a hereditary disease manifested by a change in lung conditions leading to increased colonization of pathogens, especially Pseudomonas aeruginosa (PA). The lung epithelial cells of cystic fibrosis (CF) patients frequently contain glycoconjugates with low sialylation which leads to the reveal of carbohydrate structures to which PA are bind easier, e.g. with PA-IIL lectin. Treatment of PA infection with antibiotics is problematic due to the formation of resistance. Therefore, new therapeutic approaches are studied. One of the studied options is passive immunization with chicken antibodies against PA-IIL lectin. These antibodies show the ability to reduce PA adhesion to lung epithelial cells ex vivo. In order to further study the effect of chicken antibodies, it is necessary to create an appropriate experimental in vivo model. The aim of this study was to optimize the mouse model to mimic lung conditions as in CF patients. First of all, it was necessary to select a suitable bioluminescent strain from these three strains PA-lux 1, PA-lux 2 and PA-XEN 41. On the basis of the highest measured luminescence value, the strain PA-lux 1 cultivated in a conical bottom tube was selected. Subsequently, an experiment was carried out on mice in which the effect of the enzyme neuraminidase and the...