Show simple item record

The influence of S159A mutation on the oligomeric state of human NK cell receptor NKR-P1A
dc.contributor.advisorVaněk, Ondřej
dc.creatorHausleitner, Filip
dc.date.accessioned2018-11-02T11:36:43Z
dc.date.available2018-11-02T11:36:43Z
dc.date.issued2018
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/103493
dc.description.abstractNatural killer cells (NK cells) are lymphocytes that possess cytotoxic activity against tumour or virally infected cells independent of preceding antigen sensitisation. To kill such cells, they utilise their activating and inhibitory surface receptors that interact with target cell surface molecules. The immune response carried by NK cells depends on the balance of both activating and inhibitory signals. Human NK cell surface receptor NKR-P1A belongs to the structural family of C-type lectin-like receptors. This receptor interacts with its ligand LLT1, which belongs to the same protein family, with low affinity and high specificity. The NKR-P1A:LLT1 complex formed between NK cell and its target cell inhibits NK cell cytotoxicity, and hence is a part of the regulation of immune response. This thesis studied the effect of S159A mutation on the stoichiometric state of soluble human NKR-P1A ectodomain in solution. Therefore, a mutant form of NKR-P1A G90-S225 S159A ectodomain was successfully produced in stably transfected human embryonic kidney cells 293 (HEK293S GnTI" ). This construct was purified by affinity and size-exclusion chromatography, and analysed by SDS-PAGE and analytical ultracentrifugation. Our results show that the preclusion of N-linked glycosylation in the position 157 promotes the...en_US
dc.description.abstractPřirozeně zabíječské buňky (NK buňky) jsou lymfocyty schopné ničit nádorové a viry infikované buňky bez předešlé antigenní senzitizace. Využívají k tomu svoje aktivační a inhibiční povrchové receptory, které interagují s povrchovými molekulami cílových buněk. Imunitní odpověď NK buněk závisí na celkovém součtu signálů z obou typů receptorů. Receptor NKR-P1A lidských NK buněk patří do strukturní rodiny receptorů podobných lektinům C-typu. Tento receptor interaguje s jeho ligandem LLT1 ze stejné proteinové rodiny, přičemž tato interakce je charakterizována nízkou afinitou a vysokou specifitou. Vytvoření komplexu NKR-P1A:LLT1 mezi NK buňkou a cílovou buňkou inhibuje cytotoxicitu NK buňky, a tak je součástí regulace imunitní odpovědi. V této práci byl studován vliv mutace S159A na oligomerní stav rozpustné ektodomény lidského NKR-P1A v roztoku. Pro tento účel byla úspěšně rekombinantně připravená mutantní forma rozpustné ektodomény lidského NKR-P1A G90-S225 S159A ve stabilně transfekovaných lidských embryonálních ledvinných buňkách 293 (HEK293S GnTI" ). Připravený konstrukt byl purifikován pomocí afinitní a gelové permeační chromatografie a následně analyzován pomocí SDS-PAGE a sedimentační analýzy. Výsledky potvrzují, že absence N-vázané glykosylace v pozici 157 podporuje dimerizaci ektodomény v...cs_CZ
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakultacs_CZ
dc.subjectimunitní systémcs_CZ
dc.subjectrekombinantní expresecs_CZ
dc.subjectHEK293cs_CZ
dc.subjectNKR-P1Acs_CZ
dc.subjectCD161cs_CZ
dc.subjectNK buňkycs_CZ
dc.subjectpiggyBaccs_CZ
dc.subjectimmune systemen_US
dc.subjectrecombinant expressionen_US
dc.subjectHEK293en_US
dc.subjectNKR-P1Aen_US
dc.subjectCD161en_US
dc.subjectNK cellsen_US
dc.subjectpiggyBacen_US
dc.titleVliv mutace S159A na oligomerní stav NKR-P1A receptoru lidských NK buněkcs_CZ
dc.typebakalářská prácecs_CZ
dcterms.created2018
dcterms.dateAccepted2018-06-11
dc.description.departmentKatedra biochemiecs_CZ
dc.description.departmentDepartment of Biochemistryen_US
dc.description.facultyFaculty of Scienceen_US
dc.description.facultyPřírodovědecká fakultacs_CZ
dc.identifier.repId198130
dc.title.translatedThe influence of S159A mutation on the oligomeric state of human NK cell receptor NKR-P1Aen_US
dc.contributor.refereeKožíšek, Milan
thesis.degree.nameBc.
thesis.degree.levelbakalářskécs_CZ
thesis.degree.disciplineBiochemistryen_US
thesis.degree.disciplineBiochemiecs_CZ
thesis.degree.programBiochemiecs_CZ
thesis.degree.programBiochemistryen_US
uk.thesis.typebakalářská prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csPřírodovědecká fakulta::Katedra biochemiecs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Science::Department of Biochemistryen_US
uk.faculty-name.csPřírodovědecká fakultacs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Scienceen_US
uk.faculty-abbr.csPřFcs_CZ
uk.degree-discipline.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-discipline.enBiochemistryen_US
uk.degree-program.csBiochemiecs_CZ
uk.degree-program.enBiochemistryen_US
thesis.grade.csVýborněcs_CZ
thesis.grade.enExcellenten_US
uk.abstract.csPřirozeně zabíječské buňky (NK buňky) jsou lymfocyty schopné ničit nádorové a viry infikované buňky bez předešlé antigenní senzitizace. Využívají k tomu svoje aktivační a inhibiční povrchové receptory, které interagují s povrchovými molekulami cílových buněk. Imunitní odpověď NK buněk závisí na celkovém součtu signálů z obou typů receptorů. Receptor NKR-P1A lidských NK buněk patří do strukturní rodiny receptorů podobných lektinům C-typu. Tento receptor interaguje s jeho ligandem LLT1 ze stejné proteinové rodiny, přičemž tato interakce je charakterizována nízkou afinitou a vysokou specifitou. Vytvoření komplexu NKR-P1A:LLT1 mezi NK buňkou a cílovou buňkou inhibuje cytotoxicitu NK buňky, a tak je součástí regulace imunitní odpovědi. V této práci byl studován vliv mutace S159A na oligomerní stav rozpustné ektodomény lidského NKR-P1A v roztoku. Pro tento účel byla úspěšně rekombinantně připravená mutantní forma rozpustné ektodomény lidského NKR-P1A G90-S225 S159A ve stabilně transfekovaných lidských embryonálních ledvinných buňkách 293 (HEK293S GnTI" ). Připravený konstrukt byl purifikován pomocí afinitní a gelové permeační chromatografie a následně analyzován pomocí SDS-PAGE a sedimentační analýzy. Výsledky potvrzují, že absence N-vázané glykosylace v pozici 157 podporuje dimerizaci ektodomény v...cs_CZ
uk.abstract.enNatural killer cells (NK cells) are lymphocytes that possess cytotoxic activity against tumour or virally infected cells independent of preceding antigen sensitisation. To kill such cells, they utilise their activating and inhibitory surface receptors that interact with target cell surface molecules. The immune response carried by NK cells depends on the balance of both activating and inhibitory signals. Human NK cell surface receptor NKR-P1A belongs to the structural family of C-type lectin-like receptors. This receptor interacts with its ligand LLT1, which belongs to the same protein family, with low affinity and high specificity. The NKR-P1A:LLT1 complex formed between NK cell and its target cell inhibits NK cell cytotoxicity, and hence is a part of the regulation of immune response. This thesis studied the effect of S159A mutation on the stoichiometric state of soluble human NKR-P1A ectodomain in solution. Therefore, a mutant form of NKR-P1A G90-S225 S159A ectodomain was successfully produced in stably transfected human embryonic kidney cells 293 (HEK293S GnTI" ). This construct was purified by affinity and size-exclusion chromatography, and analysed by SDS-PAGE and analytical ultracentrifugation. Our results show that the preclusion of N-linked glycosylation in the position 157 promotes the...en_US
uk.file-availabilityV
uk.publication.placePrahacs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Přírodovědecká fakulta, Katedra biochemiecs_CZ
thesis.grade.code1


Files in this item

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV