http://hdl.handle.net/20.500.11956/1922 Theses 2026-07-24T09:57:01Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/211705 Úloha enzymů redukujících karbonyly v rozvoji lékové rezistence u parazitické hlístice Haemonchus contortus Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Mgr. Nikola Rychlá Supervisor: Assoc. Prof. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Consultant: RNDr. Lucie Raisová-Stuchlíková, Ph.D. Title of Diploma Thesis: The Role of Carbonyl-Reducing Enzymes in the Development of Drug Resistance in the Parasitic Nematode Haemonchus contortus Haemonchosis caused by the parasitic nematode Haemonchus contortus is a serious disease affecting mainly small ruminants, sheep, and goats. The administration of anthelmintics is one of the most common forms of prophylaxis and treatment. However, the effectiveness of this approach is significantly limited by the low number of available anthelmintics and the increase in anthelmintic resistance. These factors complicate infection control and lead to increased livestock mortality, which is associated with economic losses. Carbonyl-reducing enzymes (CRE) contribute not only to the deactivation of anthelmintics carrying a carbonyl group (flubendazole, mebendazole) through their catalytic activity, but also play a key role in the endogenous metabolism of nematodes. Increased expression of carbonyl-reducing enzymes and higher amounts of reduced metabolites have been confirmed in the resistant strain of H. contortus, suggesting their...; Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Nikola Rychlá Školitel: doc. Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Konzultant: RNDr. Lucie Raisová-Stuchlíková, Ph.D. Název disertační práce: Úloha enzymů redukujících karbonyly v rozvoji lékové rezistence u parazitické hlístice Haemonchus contortus Haemonchóza způsobená parazitickou hlísticí Haemonchus contortus představuje závažné onemocnění postihující především malé přežvýkavce, ovce a kozy. Podávání anthelmintik je jednou z nejčastějších forem profylaxe a léčby. Avšak efektivitu tohoto přístupu zásadně omezuje nízký počet dostupných anthelmintik a nárůst anthelmintické rezistence. Tyto faktory výrazně komplikují kontrolu infekce, vedou k zvýšené mortalitě hospodářských zvířat, která je spojená s ekonomickými ztrátami. Enzymy redukující karbonyly (CRE) svou katalytickou aktivitou přispívají nejen k deaktivaci anthelmintik nesoucí karbonylovou skupinu (flubendazol, mebendazol), ale také hrají klíčovou roli v endogenním metabolismu hlístice. Zvýšená exprese enzymů redukujících karbonyly i vyšší množství redukovaných metabolitů bylo potvrzeno u rezistentního kmene H. contortus, což nasvědčuje jejich možnou roli v rozvoji anthelmintické rezistence. V genomu H. contortus bylo identifikováno 46 zástupců SDR a 22... 2026-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/211704 Studium fotodynamické aktivity nových fotosensitizérů za použití 2D a 3D nádorových modelů. Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Training Workplace Department of Biochemical Sciences Doctoral Degree Program Xenobiochemistry and Pathobiochemistry Candidate Mgr. Magdaléna Kozlíková Supervisor RNDr. Magdaléna Kozlíková Advisor Title of Doctoral Thesis Investigation of photodynamic activity of novel photosensitizers using 2D and 3D tumor models. Cancer remains one of the most serious challenges in modern medicine, and despite advances in chemotherapy, radiotherapy, and immunotherapy, there remains a need to develop therapies that are selective, less toxic, and capable of overcoming tumor cell resistance. One of such methods is photodynamic therapy (PDT), a promising minimally invasive approach. PDT uses light-activated drugs (so called photosensitizers, PS) to produce cytotoxic reactive oxygen species. However, the success of PDT depends fundamentally on the structure and photophysical properties of the PS, its intracellular localization and ability to penetrate tumor tissue, and the possibilities for its targeted delivery. Therefore, this dissertation thesis focuses on a comprehensive study of new porphyrinoid- and BODIPY-based derivatives, including the formation of PS complexes with cucurbit[7]uril (CB[7]) using supramolecular interaction. Among other things,...; Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Školicí pracoviště Katedra biochemických věd Doktorský studijní program Xenobiochemie a patobiochemie Kandidátka / kandidát Mgr. Magdaléna Kozlíková Školitelka / školitel RNDr. Miloslav Macháček, Ph.D. Konzultantka / konzultant Název disertační práce Studium fotodynamické aktivity nových fotosensitizérů za použití 2D a 3D nádorových modelů. Nádorová onemocnění představují jednu z nejzávažnějších výzev současné medicíny a navzdory pokroku v chemoterapii, radioterapii či imunoterapii zůstává potřeba vývoje terapií, které jsou selektivní, méně toxické a schopné překonat rezistenci nádorových buněk. Fotodynamická terapie (PDT) patří mezi takové přístupy: jde o perspektivní a minimálně invazivní metodu. PDT využívá světlem aktivovaná léčiva - fotosensitizéry (PS) - k produkci cytotoxických reaktivních forem kyslíku. Úspěch PDT však zásadně závisí na struktuře a fotofyzikálních vlastnostech PS, a jeho intracelulární lokalizaci a schopnosti pronikat do nádorové tkáně, případně na možnostech jeho cíleného doručení. Tato disertační práce se proto zaměřuje na komplexní studium nových PS ze skupiny porfyrinoidů a BODIPY derivátů, včetně tvorby komplexů PS s kukurbit[7]urilem (CB[7]) pomocí supramolekulární interakce. Byla hodnocena mj. fotodynamická... 2026-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/211699 Indolové alkaloidy v nažkách Centaurea cyanus L. (Asteraceae) Pelikánová, Eva. Indole alkaloids from the achenes of Centaurea cyanus L. (Asteraceae). Hradec Králové, 2025. Diploma thesis. Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Department of Pharmacognozy and Pharmaceutical Botany; 70 pages. The diploma thesis focuses on the phytochemical study of Centaurea cyanus L. alkaloids. The aim of this ongoing study was isolation of alkaloids from selected the fraction No. 30-38 and the combined fractiones 39-134, which were obtained from chromatography of the alkaloid extract obtained from Centaurea cyanus L. achenes. The indole alkaloid adrabbine (EP-1; 8.50 mg) was obtained from fraction 30-38 using preparative TLC. The indole alkaloid EP-2 (2.40 mg) was isolated from fraction No. 39-134 using flash chromatography followed by preparative TLC chromatography. Identification of the alkaloids was carried out using conventional spectroscopic and spectrometric methods (NMR and LC-MS analyses and measurement of optical rotation and circular dichroism - ECD spectra). The absolute configuration of the isolated compounds was not fully resolved at the time of submission of this thesis. Keywords: Centaurea cyanus L., Asteraceae, achenes, indole alkaloids, isolation, circular dichroism; Pelikánová, Eva. Indolové alkaloidy v nažkách Centaurea cyanus L. (Asteracea). Hradec Králové, 2025. Diplomová práce. Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky; 70 str. Diplomová práce se zabývá fytochemickou studií alkaloidů Centaurea cyanus L. Cílem této pokračující studie byla izolace alkaloidů z frakcí 30-38 a 39-134, které byly získány z chromatografie alkaloidního extraktu z nažek Centaurea cyanus L. Z frakce 30-38 byl za použití preparativní TLC získán indolový alkaloid adrabbin (EP-1; 8,50 mg). Pomocí flash chromatografie a následné preparativní TLC chromatografie byl z frakce 39-134 izolován indolový alkaloid EP-2 (2,4 mg). Identifikace alkaloidů byla provedena za použití běžných spektrálních a spektrometrických metod (NMR, LC-MS analýzy a změření optické otáčivosti a cirkulárního dichroismu - ECD spekter.). Absolutní konfigurace sloučenin nebyla v době odevzdání této diplomové práce plně dořešena. Klíčová slova: Centaurea cyanus L., Asteraceae, nažky, indolové alkaloidy, izolace, cirkulární dichroismus 2025-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/211698 Izolace a strukturní analýza sekundárních metabolitů ze Zephyranthes candida III. Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department Pharmacognosy and Pharmaceutical Botany Candidate: Marie Pechmanová Supervisor: PharmDr. Jana Křoustková, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Isolation and Structure Elucidation of Secondary Metabolites from Zephyranthes candida III. This diploma thesis focuses on the isolation and structural analysis of secondary metabolites from Zephyranthes candida (Amaryllidaceae), which is known for its high alkaloid content. An alkaloid extract prepared from 52.6 kg fresh plant bulbs was used as the starting material for isolation. Initial separation was performed by Dr. Jesús García Díaz. Subsequent separation was carried out using automated flash chromatography, and the resulting fractions were further purified by flash chromatography or solid-phase extraction to ensure the purity of the isolated compounds. During the study, four alkaloids were isolated - 7-methoxy-O-methyllycorenine, haemanthamin, 11-hydroxylycoramine and zephyranine F. Their structures and identities were determined primarily by NMR spectroscopy, requiring analysis through advanced 2D NMR experiments (COSY, HSQC and HMBC). The identified structures were subsequently confirmed by comparing analytical data (GC-MS, 1H and 13C NMR, LC-MS and polarimetry) with the literature. All...; Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognosie a farmaceutické botaniky Kandidát: Marie Pechmanová Školitel: PharmDr. Jana Křoustková, Ph.D. Název diplomové práce: Izolace a strukturní analýza sekundárních metabolitů ze Zephyranthes candida III. Tato diplomová práce se zabývá izolací a strukturní analýzou sekundárních metabolitů z rostliny Zephyranthes candida (čeleď Amaryllidaceae), která je známá vysokým obsahem alkaloidů. Jako výchozí materiál k izolaci byl použit alkaloidní extrakt připravený z 52,6 kg čerstvých cibulí rostliny. Úvodní separaci provedl Dr. Jesús García Díaz. Následná separace byla realizována s využitím automatizované flash chromatografie a získané frakce byly dále purifikovány flash chromatografií nebo extrakcí na pevné fázi, aby byla zajištěna čistota izolovaných sloučenin. V průběhu práce byly izolovány čtyři známé alkaloidy - 7-methoxy-O-methyllycorenin, haemanthamin, 11-hydroxylycoramin a zephyranin F. Jejich struktura a totožnost byla určena zejména pomocí NMR spektroskopie, přičemž bylo zapotřebí provést analýzu pokročilými 2D NMR experimenty (COSY, HSCQ a HMBC). Identifikované struktury byly následně potvrzeny na základě porovnání dat z analytických metod (GC-MS, 1H a 13C NMR, LC-MS a polarimetrie) s odbornou literaturou. Všechny čtyři... 2026-01-01T00:00:00Z