http://hdl.handle.net/20.500.11956/1908 Theses 2026-06-29T12:26:13Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/209671 Návrh a studium kurkuminoidů s důrazem na cytostatický a migrastatický efekt EN This study focuses on the investigation of the biological effects of synthetic monoketone curcumin derivatives (SL1-SL3) and novel Ru(II) complexes (SL4-SL6) in selected head and neck cancer cell lines. Their cytotoxic, antiproliferative, and migrastatic activities were evaluated, together with their ability to modulate the NF-κB signaling pathway and their potential to influence the levels of the pro-inflammatory cytokines IL-6, IL-8, and the IL-6 receptor (IL-6R). The study also included an assessment of the antibacterial activity of selected curcuminoids and their ability to interact with bacterial endotoxins. The results demonstrated that the synthetic curcumin derivatives exhibit pronounced cytotoxic effects against head and neck cancer cell lines and effectively suppress both cell proliferation and migration. In addition, derivatives SL1 and SL2 showed significant antibacterial activity against both Gram-positive and Gram-negative bacteria and demonstrated the ability to interact with lipopolysaccharides, which may contribute to the modulation of inflammatory responses. These derivatives also affected NF-κB activity and the levels of the cytokines IL-6 and IL-8, with SL2 exhibiting the most pronounced inhibitory effect on the investigated targets. The studied Ru(II) complexes displayed...; CZ Tato práce se zaměřuje na studium biologických účinků syntetických monoketonových derivátů kurkuminu (SL1-SL3) a nových Ru(II) komplexů (SL4-SL6) na vybrané buněčné linie karcinomu hlavy a krku. Byly hodnoceny jejich cytotoxické, antiproliferativní a migrastatické účinky, dále jejich schopnost modulovat signalizační dráhu NF-κB a potenciál ovlivňovat hladiny prozánětlivých cytokinů IL-6, IL-8 a receptoru IL-6R. Součástí studie bylo také hodnocení antibakteriální aktivity vybraných kurkuminoidů a jejich schopnosti interagovat s bakteriálními endotoxiny. Výsledky ukázaly, že syntetické deriváty kurkuminu vykazují výraznou cytotoxicitu vůči nádorovým liniím hlavy a krku a účinně potlačují proliferaci i migraci nádorových buněk. Deriváty SL1 a SL2 zároveň prokázaly významnou antibakteriální aktivitu vůči grampozitivním i gramnegativním bakteriím a schopnost interagovat s lipopolysacharidy, což může přispívat k modulaci zánětlivé odpovědi. Tyto deriváty rovněž ovlivňovaly aktivitu NF-κB a hladiny cytokinů IL-6 a IL-8, přičemž SL2 vykazovala nejvýraznější inhibiční účinek na sledované cíle. Studované Ru(II) komplexy vykazovaly silnou cytotoxickou, antiproliferativní a migrastatickou aktivitu a zasahovaly do signalizace NF-κB inhibicí IKKβ a narušením vazby p65 na DNA, což vedlo ke snížení produkce... 2026-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/209661 The role of calcium and 14-3-3 in the regulation of human ubiquitin ligase Nedd4-2 Nedd4-2 (neuronal precursor cell-exprimed developmentally down-regulated 4-like) ubikvitin ligáza je členem podrodiny Nedd4 HECT E3. Je všudypřítomně exprimována a reguluje řadu cílů, primárně integrální membránové proteiny, čímž moduluje různé signální dráhy a přispívá k rozvoji patologických stavů (např. hypertenze, onemocnění ledvin, cystická fibróza, epilepsie a kardiomyopatie). Nedd4-2 podléhá regulaci prostřednictvím celé škály mechanismů; tato práce se zaměřuje na čtyři klíčové režimy: 1) autoinhibici zprostředkovanou intramolekulární vazbou; 2) vápníkem závislou aktivaci; 3) interakce s membránou; a 4) inhibici závislou na fosforylaci zprostředkovanou homodimerem 14-3-3η, rigidním scaffoldovým proteinem. Experimentální práce kombinovala funkční testy (vazba na lipozomy a ubikvitinační eseje), biofyzikální techniky (diferenciální skenovací fluorimetrii, spektroskopii cirkulárního dichroismu, víceúhlový dynamický rozptyl světla, a analytickou ultracentrifugaci) a strukturní charakterizaci (kryoelektronovou mikroskopii, maloúhlový rozptyl rentgenového záření, a vodíko-deuteriovou výměnu ve spojení s hmotnostní spektrometrií). Výsledky poskytují vhled do regulačních mechanismů Nedd4-2 a mohou být aplikovány při vývoji farmakologických strategií zaměřených na onemocnění spojená s Nedd4-2. 2026-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/209592 Metabolické důsledky vyléčení chronické HCV infekce Chronic HCV infection is a leading cause of chronic liver disease worldwide and it is associated with disease progression. Viral eradication, defined as sustained virological response (SVR), reduces the risk of liver failure. Treatment with direct-acting antivirals (DAAs) results in SVR in almost all cases. However, weight gain may occur as an unfavourable consequence after HCV cure. The primary aim of this study was to identify genetic and non- genetic factors associated with weight gain following HCV eradication. The secondary aim was to determine predictors of advanced fibrosis in patients with a history of intravenous drug use prior to initiation of HCV therapy. We enrolled 230 patients treated with DAAs 3 years after achieving SVR, along with a control group of 640 individuals from the population-based MONICA study, also followed for 3 years. Patients showed an increase in BMI (median + 0.39 kg/mš). Carriers of at least one G allele of the PNPLA3 gene (CG+GG) had a significantly higher BMI increase compared to CC homozygotes (0.94 vs. 0.0 kg/mš; p = 0.0045), with an allele dose-dependent effect (GG +2.42 vs. CG 0.87 kg/mš, p = 0.03). Although BMI also increased in the control group, no association with PNPLA3 genotype was observed. In multivariate analysis, G allele carriage was the only...; Souhrn Chronická infekce virem hepatitidy C (HCV) je celosvětově jednou z nejčastějších příčin chronického onemocnění jater. Je spojena s rizikem progrese jaterního onemocnění. Vyléčení (dosažení setrvalé virologické odpovědi, SVR) snižuje riziko selhání jater. Léčba přímo působícími antivirotiky (DAA) vede k dosažení SVR téměř vždy. Nepříznivým důsledkem vyléčení chronické HCV může být vzestup tělesné hmotnosti. Hlavním cílem práce bylo identifikovat genetické i negenetické faktory podílející se na vzestupu hmotnosti po vyléčení HCV. Vedlejším cílem bylo stanovit prediktory pokročilé fibrózy u pacientů s anamnézou nitrožilního užívání drog před zahájením léčby HCV infekce. Do hlavní studie bylo zařazeno 230 pacientů léčených DAA aktuálně 3 roky po dosažení SVR a kontrolní skupina 640 jedinců z populační studie MONICA sledovaná též po dobu 3 let. U pacientů došlo během 3 let po léčbě k nárůstu BMI (medián + 0,39 kg/mš). Nosiči alespoň jedné alely G PNLA3 (CG+GG) vykazovali signifikantně vyšší nárůst BMI než homozygoti CC (0,94 vs. 0,0 kg/mš; p = 0,0045), přičemž byl prokázán efekt závislý na dávce alely (GG + 2,42 vs. CG 0,87 kg/mš, p = 0,03). BMI stouplo během 3 let sledování i v kontrolní skupině, vzestup nebyl asociován s genotypy PNPLA3. V multivariantní analýze bylo nosičství alely G jediným nezávislým... 2026-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/209590 Metabolismus železa a jeho mechanismus pro terapeutickou intervenci nádorových onemocnění EN The aim of this work was to study newly synthesized iron chelators, perform their chemical characterization and biological evaluation (compounds 4-6), verify their chelating activity toward iron ions, and assess their potential as anticancer agents. The compounds were prepared through multistep synthesis and characterized using NMR spectroscopy, HRMS, and elemental analysis. Their interactions with Fe2+ and Fe3+ ions were investigated by UV-Vis spectroscopy, and the stability constants (K) as well as the complex stoichiometries were determined. The biological effects were examined using pancreatic cancer cell lines (MIA PaCa-2, PANC-1, AsPC-1) and the non-cancerous control line BJ-hTERT. Cytotoxicity was assessed by the MTT assay, where the compounds exhibited low IC₅₀ values in the micromolar range and pronounced selectivity toward cancer cells. Fluorescence microscopy confirmed their accumulation in mitochondria and lysosomes, suggesting a possible link to mitophagy. Furthermore, Western blotting demonstrated an effect on the expression of NDRG1, TfR1, and HIF-1α proteins, indicating that the chelators influence iron metabolism, cell proliferation, and hypoxic response. These results suggest that the tested compounds represent promising chelator-based therapeutics with a targeted effect on the...; CZ Cílem práce bylo studium nově nasyntetizovaných chelátorů, jejich charakterizace a biologické hodnocení (4-6), ověření jejich chelatační aktivity vůči iontům železa a potenciál jako protinádorových látek. Sloučeniny byly připraveny vícestupňovou syntézou a charakterizovány pomocí NMR spektroskopie, HRMS a elementární analýzy. Jejich interakce s Fe2+ a Fe3+ byla sledována UV-Vis spektroskopií, přičemž byly stanoveny stabilitní konstanty (K) a stechiometrie vzniklých komplexů. Biologické účinky byly zkoumány na buněčných liniích pankreatického karcinomu (MIA PaCa-2, PANC-1, AsPC-1) a kontrolní linii BJ-hTERT. Cytotoxicita byla hodnocena metodou MTT, kde sloučeniny vykázaly nízké IC₅₀ v mikromolárním rozmezí a výraznou selektivitu k nádorovým buňkám. Fluorescenční mikroskopie potvrdila jejich akumulaci v mitochondriích a lysozomech, což naznačuje možnou souvislost s mitofagií. Western blotting dále prokázal vliv na expresi proteinů NDRG1, TfR1 a HIF-1α, čímž se potvrdil vliv chelátorů na metabolismus železa, buněčnou proliferaci a hypoxickou odpověď. Tyto výsledky naznačují, že testované látky představují perspektivní chelátorová terapeutika s cíleným účinkem na mitochondriální a železnou homeostázu nádorových buněk. Klíčová slova: chelátory železa, azulenové hydrazony, pankreatický karcinom,... 2026-01-01T00:00:00Z