http://hdl.handle.net/20.500.11956/1900 Faculty of Pharmacy in Hradec Králové 2026-07-07T22:37:07Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/210184 Vliv malých fenolických metabolitů flavonoidů (propionových kyselin) na železem katalyzovanou Fentonovu reakci Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacognosis and Pharmaceutical Botany Candidate: Sára Spiller Supervisor: PharmDr. Zuzana Lomozová, Ph.D. Title of diploma thesis: The impact of small phenolic metabolites of flavonoids (propionic acids) on the iron-catalysed Fenton reaction Keywords: iron, flavonoid, Fenton reaction, antioxidant, pro-oxidant Iron is an essential element, necessary for the proper functioning of the human body. It is involved in many cellular processes where it acts as a cofactor. It is physiologically very important, especially for its ability to readily accept and deliver electrons. Its amount in the body is strictly regulated because in excess of the free metal, harmful radical reactions and the development of oxidative stress could result. Oxidative stress is responsible for many pathological processes. Flavonoids are natural polyphenolic substances that are found in many plants. Their consumption is associated with beneficial effects on human health, including antioxidant, anti-inflammatory, and cardioprotective properties. Despite their beneficial effects, they may, under certain circumstances, possess pro-oxidant effects related to their redox properties. During the metabolism of flavonoids, the gut microbiome degrades them to simple...; Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie a farmaceutické botaniky Kandidát: Sára Spiller Školitel: PharmDr. Zuzana Lomozová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv malých fenolických metabolitů flavonoidů (propionových kyselin) na železem katalyzovanou Fentonovu reakci Klíčová slova: železo, flavonoid, Fentonova reakce, antioxidant, pro-oxidant Železo je esenciální prvek, nezbytný pro správné fungování lidského organismu. Zapojuje se do mnoha buněčných procesů, kde působí jako kofaktor. Je fyziologicky velmi důležitý, zejména pro svou schopnost snadno přijímat a odevzdávat elektrony. Jeho množství v těle je přísně regulováno, protože v nadbytku volného kovu, by mohlo docházet k škodlivým radikálovým reakcím a rozvoji oxidačního stresu. Oxidační stres je zodpovědný za mnohé patologické procesy. Flavonoidy jsou přírodní polyfenolické látky, které jsou obsaženy v řadě rostlin. Jejich konzumace je spojována s příznivými účinky na lidské zdraví, mezi které patří antioxidační, protizánětlivé a kardioprotektivní vlastnosti. Navzdory jejich prospěšnému účinku, mohou za určitých okolností projevovat účinky pro-oxidační, související s jejich redoxními vlastnostmi. Během metabolismu flavonoidů dochází vlivem střevního mikrobiomu k jejich degradaci na jednoduché fenolické... 2026-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/210183 Optimalizace reakcí vedoucích k syntéze značených sfingoidních bazí Title of the master thesis: Optimalization of reactions leading to the synthesis of labeled sphingoid bases Candidate: Veronika Sovová Supervisor: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Consultant: Mgr. Tomáš Havrišák Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Skin Barrier Research Group, Department of Organic and Bioorganic Chemistry The stratum corneum (SC) represents a key part of the skin barrier, located on the entire surface of the epidermis, which is subject to a constant renewal process. The SC is made up of corneocytes, lipids and desmosomes, with the lipid matrix being crucial for maintaining barrier function. The main components of these lipids are ceramides, cholesterol and free fatty acids. Ceramides play a vital role in skin protection and their basic components are sphingoid bases, aliphatic amino alcohols with a long chain, which together with fatty acids form the basic building blocks of sphingolipids. There are four basic sphingoid bases in the skin barrier: sphingosine, dihydrosphingosine, phytosphingosine and 6-hydroxysphingosine. These compounds differ in the presence of double bonds and hydroxyl groups, each contributing to the function and structure of ceramides in the skin. Mass spectrometry is very often used to quantify lipids from human SC. However, in order to...; Název diplomové práce: Optimalizace reakcí vedoucích k syntéze značených sfingoidních bází Autor: Veronika Sovová Školitel: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Konzultant: Mgr. Tomáš Havrišák Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Skin Barrier Research Group, Katedra organické chemie a bioorganické chemie Stratum corneum (SC) představuje klíčovou část kožní bariéry, nacházející se na úplném povrchu epidermis, která podléhá neustálému procesu obnovy. SC je tvořeno zrohovatělými buňkami (korneocyty), lipidy a desmozomy, přičemž lipidová matrix je klíčová pro udržení bariérové funkce. Hlavními složkami těchto lipidů jsou ceramidy, cholesterol a volné mastné kyseliny. Ceramidy hrají zásadní roli v ochraně kůže a jejich základní složkou jsou sfingoidní báze, alifatické aminoalkoholy s dlouhým řetězcem, které tvoří spolu s mastnou kyselinou základní stavební bloky sfingolipidů. V kožní bariéře se nacházejí čtyři základní sfingoidní báze: sfingosin, dihydrosfingosin, fytosfingosin a 6-hydroxysfingosin. Tyto sloučeniny se liší přítomností dvojných vazeb a hydroxylových skupin, přičemž každá z nich přispívá k funkci a struktuře ceramidů v kůži. Pro kvantifikaci lipidů z lidského SC se velmi často využívá hmotnostní spektrometrie. Aby však bylo možné látky pomocí této metody spolehlivě a přesně... 2025-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/210182 Inhibiční účinek zopolrestatu, VE-821 a berzosertibu na aktivitu vybraných reduktas z nadrodiny AKR a SDR na úrovni in vitro. Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Tereza Staňková Supervisor: prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Consultant: Mgr. Lenka Laštovičková, Ph.D. Title of diploma thesis: Inhibitory effect of zopolrestat, VE-821 and berzosertib on the activity of selected reductases from the AKR and SDR superfamilies in vitro. Increased activity of carbonyl-reducing enzymes (CRE) of the aldo-keto- reductase (AKR) and short-chain dehydrogenase/reductase (SDR) superfamilies is often associated with the development of some cancers. These enzymes are often overexpressed in these cancer tissues, promote their growth, and are largely involved in the deactivation of various cytostatics, including anthracyclines. One of the most widely used representatives of this group is daunorubicin (DAUN), whose metabolic conversion produces a more toxic alcohol metabolite, daunorubicinol (DAUNol), with reduced antitumor activity. In the in vitro experiments performed in this thesis, the inhibitory effect of three substances (zopolrestat (ZOP), VE-821 and berzosertib) on the activity of selected CREs (AKR1A1, 1B1, 1B10, 1C3 and CBR1) was investigated. Inhibition of these enzymes leads to a decrease in their activity, and thus to a decrease in the production of the...; Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Tereza Staňková Školitel: prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Konzultant: Mgr. Lenka Laštovičková, Ph.D. Název diplomové práce: Inhibiční účinek zopolrestatu, VE-821 a berzosertibu na aktivitu vybraných reduktas z nadrodiny AKR a SDR na úrovni in vitro. Zvýšená činnost karbonyl redukujících enzymů (CRE) z nadrodiny aldo- ketoreduktas (AKR) a dehydrogenas/reduktas s krátkým řetězcem (SDR) bývá spojena s rozvojem některých nádorových onemocnění. U nich jsou tyto enzymy často nadměrně exprimovány, podporují růst nádorové tkáně a ve velké míře se podílí na deaktivaci různých cytostatik, včetně antracyklinů. Jedním z nejpoužívanějších zástupců této skupiny je daunorubicin (DAUN), jehož metabolickou přeměnou vzniká více toxický alkoholový metabolit daunorubicinol (DAUNol) se sníženou protinádorovou aktivitou. V rámci in vitro experimentů vykonaných v této práci byl zkoumán inhibiční vliv tří látek (zopolrestatu (ZOP), VE-821 a berzosertibu) na aktivitu vybraných CRE (AKR1A1, 1B1, 1B10, 1C3 a CBR1). Inhibicí těchto enzymů dochází k poklesu jejich aktivity, tedy i ke snížení produkce zmíněného metabolitu DAUNolu. Z představených látek byl nejvyšší inhibiční efekt pozorován u ZOP kombinovaného s enzymy AKR1B1 a 1C3.... 2025-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/20.500.11956/210126 Hodnocení kvality protilátek určených pro detekci endoglinu v játrech The diploma thesis deals with endoglin, a transmembrane glycoprotein that can be cleaved to form so-called soluble endoglin, which then circulates in the blood. The theoretical part of the thesis is devoted to cardiovascular and liver diseases related to changes in the expression or level of endoglin in the blood and summarizes current knowledge about endoglin and its relation to various diseases. The experimental part of the thesis describes the selection of a suitable antibody against endoglin intended for western blot (WB). We have four anti-endoglin primary antibodies available from three manufacturers. The purpose was to test the antibodies and determine, which one had the best ability to detect endoglin in mouse tissue samples such as liver or aorta on WB. Affiblot was used to verify their ability to bind endoglin and also to compare their affinities to this protein. Newly developed patented dot-blot-based device. The binding of the used antibodies to endoglin was verified using the WB method and then the results of both methods were compared. The obtained results showed that the Abcam antibody has the most suitable parameters regarding specificity and sensitivity for the identification of endoglin in mouse tissue on WB. Keywords: endoglin, soluble endoglin, NASH, cirrhosis, non-alcoholic...; Diplomová práce se zabývá endoglinem, transmembránovým glykoproteinem, který může být štěpen za vzniku tzv. solubilního endoglinu, jenž poté cirkuluje v krvi. V teoretické části práce jsou nejprve kapitoly věnující se kardiovaskulárním a jaterním onemocněním souvisejícím se změnami v expresi či hladině endoglinu v krvi, následují kapitoly shrnující dosavadní poznatky o tomto proteinu ve vztahu k různým onemocněním. Cílem experimentální části práce bylo vybrat vhodnou protilátku proti endoglinu určenou pro western blot (WB). K dispozici byly celkem čtyři primární protilátky od tří výrobců. Účelem bylo protilátky otestovat a určit, která z nich má nejlepší schopnost detekovat endoglin ve vzorcích myší tkáně, jako jsou játra nebo aorta na WB. Pro ověření jejich schopnosti vázat endoglin a také pro porovnání jejich afinit k tomuto proteinu byl použit affiblot. Nově vyvinuté a patentované zařízení fungujícího na bázi dot blotu. Vazba použitých protilátek na endoglin byla ověřena pomocí metody WB a poté byly výsledky obou metod porovnány. Ze získaných výsledků vyplynulo, že protilátka od Abcam má nejvhodnější parametry, co se týká specifity a citlivosti pro identifikaci endoglinu. Klíčová slova: endoglin, solubilní endoglin, NASH, cirhóza, nealkoholová steatohepatitida, protilátka, affiblot 2022-01-01T00:00:00Z